流式细胞术系列之-细胞凋亡分析.pptVIP

细胞凋亡检测 细胞凋亡过程 凋亡的检测方法 1. 形态学检测 光学显微镜 荧光显微镜 (Hoechst 33342，Hoechst 33258, DAPI ) 电子显微镜 2.磷脂酰丝氨酸外翻分析（可用FCM） 3.线粒体膜势能的检测 （可用FCM） 4. DNA片断化检测 （可用FCM） 5. TUNEL法 （可用FCM） 6. Caspase-3活性的检测 （可用FCM） 7. 凋亡相关分子的检测（可用FCM） 促凋亡分子: Bax, Bcl-Xs, Bak, Bad, Bid 等 抑凋亡分子: Bcl-2, Bcl-XL和bcr/abl kinase等 8. 相关信号通路分子的检测（可用FCM） 线粒体膜势能的检测 【原理】 线粒体跨膜电位的下降，是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件，一旦线粒体膜电位崩溃，细胞凋亡则不可逆转。 线粒体跨膜电位的存在，使一些亲脂性阳离子荧光染料可结合到线粒体基质，其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。 常用染料有：Rhodamine 123 、3，3-Dihexyloxacarbocyanine iodide [DiOC6（3）]、Tetrechloro-tetraethylbenzimidazol carbocyanine iodide[JC-1]、Tetramethyl rhodamine methyl ester