兽医药理学综合实验.doc

兽医药理学综合实验 第一节 简介 抗微生物药物是临床应用范围最广泛的一类药物，在防治畜禽的各种疾病中起到重要作用。因此，本章重点进行抗微生物药物的药效学和药动学综合性实验，药效学实验包括体外抗菌实验、体内抗菌实验及治疗实验等，学生应掌握药敏实验的常用方法、原理及应用，抗菌剂的作用机理、测定方法及体内感染的治疗方法；药动学实验包括药动学参数的测定、药物在组织中的分布及食品中残留的检测，学生应掌握药物在体内的代谢过程，药动学参数的含义及测定，体内药物含量的检测方法及残留检测的方法。联合用药是临床上常用手段，因此学生应掌握药物联合用药的原则及药物之间的相互作用方式，更好的指导临床用药。 中毒解救也是临床上较常见多发病，尤其是有机磷农药中毒、亚硝酸盐中毒及氰化物中毒，后果严重，如得不到及时解救会危及生命。学生应掌握药物的毒性作用、中毒症状、中毒解救的方法及原理。 任何一种新药在推荐临床试用前必须进行周密、细致、认真的毒理研究，对药物的安全性作出全面的评价，以便剔除毒性大的化合物，并找出发生不良反应的靶器官和组织。此外，还要尽可能地找出这些不良反应与剂量、疗程之间的关系以及毒性作用是否可逆和可以预防。按照规定，新药安全性评价的内容包括急性毒性实验、长期毒性实验和特殊毒性实验，后者又包括致突变实验、生殖毒性实验和致癌实验。作用于中枢神经系统的新药应进行药物依赖性实验，通过皮肤给药的药物还需进行皮肤刺激性实验及皮肤过敏性实验。 为了控制制剂质量，确保安全用药，除了进行必要的理化检验外，常常还需要从药理学的角度对制剂进行质量检查，这些检验统称为制剂的安全限度实验。限度实验主要用于检验注射剂，通常包括下列项目：热原检查、刺激性检查、过敏性检查、溶血性检查等。 第二节 抗微生物药物药效学实验 一、抗菌药物的体外抗菌实验 1．目的 通过实验了解常用抗菌药物的抗菌作用及抗菌范围，并掌握抗菌药物的某些体外抗菌实验方法。 2．实验材料 器材——镊子、火柴、酒精灯、玻璃笔、吸管、游标卡尺、试管、试管架、灭菌平皿、钵金耳、恒温箱、试纸、陶瓦盖。 药物——青霉素干纸片、链霉素干纸片、 四环素干纸片、磺胺嘧啶钠干纸片、青霉素液（8000μ/ml）。 菌种——金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌。 3．实验方法——纸片法 3.1操作：将已制备好的高柱肉汤琼脂培养基加热熔化后，待冷却至50℃左右时，加入肉汤培养基菌液1ml（经过恒温37℃培养18小时的菌液），轻轻摇动，使之均匀，然后倒入无菌的平皿内。轻轻摇晃平皿，以使培养基均匀地平铺在平皿上，待冷却凝固后，用消毒过的镊子将青霉素干纸片、链霉素干纸片、四环素干纸片、磺胺嘧啶干纸片整齐有顺序的放入平皿内。盖上陶瓦盖，标好记号置37℃ 3.2 实验纪录： 药物 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 绿脓杆菌 痢疾杆菌 青霉素 链霉素 四环素 磺胺嘧啶钠 注：上述实验的整个过程应在无菌室内进行。 附： = 1 \* GB2 ⑴ 抗菌药物干纸片的制备：将直径为6mm左右的圆形定性滤纸片消毒烘干后分别浸入下列药物中，（青霉素溶液 链霉素溶液、四环素溶液、磺胺嘧啶钠液）使其充分浸透药液，然后用另一滤纸吸去附于纸片上的药液，再置37℃恒温箱中烘干备用。（保持时间不宜过常）。 = 2 \* GB2 ⑵ 高柱肉汤琼脂培养基的制备：牛肉膏 3.0 g 、蛋白质10.0g 、氯化钠5.0g、 纯化水加至1000ml， 琼脂18.0-22.0g （依气候决定用量。天冷时少加，气温高时多加），在电炉上加热，使上述各药物全部溶解，再补足加热过程中损失的水分，调节pH至7.8。分装于试管内，每管20ml，高压灭菌后备用。 二、诺氟沙星、氧氟沙星及环丙沙星的体外抗菌活性测定 1．目的 了解用平皿稀释法和纸片法实验药物抗菌作用的步骤，观察药物不同浓度对抗菌作用的影响，了解平皿稀释法的操作过程和实验结果的判断。 2．实验材料 器材——镊子、火柴、酒精灯、玻璃笔、吸管、游标卡尺、试管、试管架、灭菌平皿、微量移液器、恒温箱、试纸。 药物——诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星3种药液（80μg/ml）。 菌种——金黄色葡萄球菌或大肠杆菌。 3．实验方法 3.1纸片法 将灭菌平皿底面向上，在底面上划三条放射线，均分为6等分，标上1～6号。用无菌吸管定量吸取实验菌液0.1ml加于100ml保温于45℃的琼脂培养基中，摇匀，倾注于无菌平皿中，待其冷凝后，备用。用无菌生理盐水将药物稀释成各种浓度，按倍比稀释的方法，稀释好备用。用镊子分别取无菌滤纸片，分别沾取不同浓度的药液，然后按划好的位置贴在含菌的平板上。将培养皿置37℃培养箱中培养，24h后观察结果。用卡尺测定每张滤纸片周围的抑菌圈的直径(mm) 大小并记录之，并比较几种 实验纪录