病毒感染干扰细胞DNA损伤修复机制的研究进展.doc

病毒感染与宿主细胞DNA损伤应答 摘要 DNA损伤应答（DNA damage response，DDR）是机体重要防御机制，参与响应各种DNA损伤，防止突变DNA积累，也是细胞抑制肿瘤形成的主要途径之一。病毒感染一方面通过多种方式激活宿主细胞DDR为病毒复制创造条件，另一方面不同病毒又通过各种机制抑制或规避DNA损伤修复对病毒的不利影响病毒和细胞之间相互作用不仅揭示了病毒-宿主相互作用新的复杂性，同时也了病毒靶作用细胞关键调节因子的认识。本文就病毒在细胞DNA损伤应答的激活、DNA损伤修复中的作用机制进行综述。 关键词 DNA损伤应答 病毒感染 肿瘤形成 1. DNA损伤应答 DNA损伤应答机制是机体长期进化形成的重要防御机制之一。据统计，正常情况下，机体每个细胞每天在各种内在或外在的损伤因素（包括过氧化物、粒子射线、紫外线、药物及病毒感染等）作用下会产生并修复达10000个DNA损伤[1]。细胞一旦检测到DNA损伤信号立即启动DNA损伤应答，一方面导致细胞周期停滞以利于损伤DNA修复，另一方面可通过细胞凋亡清除不可修复的严重损伤细胞。根据损伤DNA形式不同，主要存在两种信损伤应答号通路：一种是共济失调毛细血管扩增症蛋白（ataxia-telangiectasia mutated，ATM）通路，主要响应双链DNA断裂（double-stranded breaks，DSBs）；一种ATR通路（ATM and Rad3-related，ATR）通路，主要检测单链DNA断裂（single-stranded breaks，SSBs）[2，3]，它们进一步磷酸化激活各种底物，启动DNA损伤信号级联，激活细胞周期检验点使细胞周期停滞或诱导细胞凋亡，同时DNA修复蛋白被募集到损伤位点进行修复[4]。 病毒感染 病毒作为一种活细胞内专性寄生生物, 主要依赖于宿主细胞的各种资源来复制及合成自身成分, 最终进行装配、扩增。病毒感染宿主细胞过程包括吸附、穿入、脱壳、生物合成、组装成熟及释放等，每个阶段都需要宿主细胞的协助。病毒感染可导致靶细胞多种结局，包括溶细胞效应、稳定感染、细胞凋亡、基因组整合、细胞增殖转化及包涵体形成等，最终取决于病毒和宿主两方面的因素。大量研究表明，病毒感染的不同阶段不同病毒通过不同方式激活宿主细胞DNA损伤应答[5]。病毒感染导致DNA损伤的机制主要包括几个方面： 2.1 过度增殖 某些致癌病毒的复制必然导致细胞增殖，它们感染静止细胞使其重新进入细胞周期为其复制创造条件。这类病毒诱导的细胞异常增殖导致复制压力增加，类似于细胞癌基因激活作用，将导致DDR激活【6-10】。某些小DNA病毒通过拮抗转录抑制性的Rb蛋白从而促进E2F介导的细胞增殖。E2F的过度活化可激活ATM依赖的DDR，从而抑制细胞生长【6,7】。人乳头瘤病毒（Human papilloma virus，HPV）的E7蛋白和猴病毒（simian virus 40，SV40）大T抗原直接作用于Rb，阻断Rb与E2F的相互作用，游离E2F促进S期细胞DNA复制【8】。最近研究还发现，HPV E6和E7蛋白过表达导致原代角质细胞复制压力增加，提示E7介导的Rb拮抗作用可导致细胞DNA复制起始失控，进一步导致DNA损伤增加，可能与宫颈癌发生有关【9】。另外，Boichuk等发现SV40 大T抗原能激活ATM介导的DDR【10】。 EBV( Epstein- Barr virus)体外感染人 B细胞能短暂激活ATM介导的DDR。EBV能模拟体内B细胞淋巴瘤形成的生理刺激及存活信号导致培养的原代人B细胞永生化。近期研究显示，在EBV感染的原代B细胞中，早期癌蛋白表达导致细胞过度增殖和ATM及其下游DDR激活【11】。有趣的是，感染早期抑制ATM及下游激酶Chk2能极大地增加转化效率，说明DDR能阻断EBV感染早期的异常细胞增殖。EBV导致的DDR激活与病毒转录活化因子EBNA2有关，EBNA2转录抑制因子EBNA3C活化后，EBNA2和DDR活性均减弱；另一方面，遗传缺失EBNA3C会导致细胞增殖失控并且ATM高度活化【11】。 ? γ疱疹病毒（γ-herpesvirus）和卡波济肉瘤相关疱疹病毒（Kaposis sarcoma-associated herpesvirus，KSHV）也参与了DDR信号通路激活。KSHV感染的B细胞和内皮细胞促进原发性渗出性淋巴瘤和KS两种艾滋病患者常见肿瘤的发展【12】。Koopal等发现，KSHV感染永生化的内皮细胞会导致ATM信号通路激活。而单独表达KSHV潜伏感染病毒蛋白cyclin D同源异构体(v-cyclin)也能激活ATM。与EBV相似，KS早期损伤中DDR激活也可能是由细胞过度增殖造成的【13】。 乙肝病毒（Hepa