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糖尿病肾病小鼠模型摘 要：糖尿病肾病是糖尿病的主要并发症之一，也是终末期肾衰的主要原因，其发病机制至今尚未阐明。因此，建立理想的实验动物模型是研究糖尿病肾病发病机制、疾病防治、新药开发的关键环节。本文回顾并总结了各种糖尿病小鼠小鼠模型，为选择合适的动物模型应用于糖尿病肾病的研究提供参考。关键词：糖尿病肾病 小鼠模型糖尿病肾病( diabetic nephropathy, DN)是糖尿病常见的微血管并发症, 是导致终末期肾病(end stage renal disease,ESRD)的主要原因之一，也是糖尿病病人的主要死因, 严重危害着人类健康。研究发现DN的发生可能与血流动力学改变、氧化应激与糖代谢紊乱、胰岛素抵抗、细胞因子作用以及遗传背景等多种因素密切相关[1]。但是，对DN发病机制尚不完全清楚,合适的DN动物模型的建立对于深入探讨DN的发病机制及DN治疗药物的开发具有重要的意义。2001年，美国国立卫生研究所（National Institutes of Health,NIH）组建了糖尿病并发症动物模型工作组（Animal models Diabetic of Complica-tions Consortium，AMDCC），工作组致力于糖尿病并发症动物模型的建立和标准化。AMDCC成立之初，即着手于定义各种糖尿病并发症动物模型的造模成功的准则。其中DN的准则[2]如下：(1) 整个生存期GFR至少下降50%；(2) 与同一品系相同性别相同年龄的对照相比，造模动物尿蛋白增加超过10倍;(3) 系膜基质增生，伴或不伴结节性硬化和系膜溶解，不同程度的小动脉透明样变，基底膜增厚超过基线水平的50%，小管间质纤维化。理想的动物模型是应该具备上述准则的表型的，但实际中建立符合上述所有准则的动物模型是困难的。本文将从药物诱导性模型、自发性模型、基因工程模型DN小鼠模型三方面对国内外的研究进展做一综述。1 化学药物诱导性模型制备DN动物模型的诱发药物包括链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)、四氧嘧啶(alloxan,ALX)、链脲佐菌素联合弗氏完全佐剂以及四氧嘧啶加嘌呤霉素等。最为常用的是链脲佐菌素(STZ)。STZ是属于乙酰氨基葡萄糖（N-acetylglucosamine ，GlcNAc)的一种， 经由GLUT-2受体转运至胰岛β细胞。STZ通过选择性抑制O-连接的N-乙酰氨基葡糖胺水解酶（O-GlcNAcase），导致胰岛细胞内蛋白质的不可逆的O-糖基化，从而造成胰岛β细胞的凋亡，丧失分泌胰岛素功能[3]。目前STZ诱导糖尿病肾病小鼠模型主要集中在Ⅰ型糖尿病，包括三种剂量的诱导。主要的造模小鼠品系有C57BL/6、C57BLKS、Balb/c、DBA2等。低剂量STZ多次诱导大量的实验研究已经建立了可信的低剂量STZ多次诱导的DN的小鼠模型的方案。AMDCC的方案是7-8周的小鼠禁食四小时，腹腔注射50mg/Kg的STZ，连续五天。2周内出现高血糖，5周内开始出现蛋白尿。在早期，肾脏组织学主要表现为肾小球的肥大，可能主要是因为肾组织血流动力学的改变所引起的。之后，会出现系膜的扩张，一些品系的小鼠会发生系膜硬化。只有少数品系的小鼠（如KK）会发生小动脉透明样变和结节性硬化。Tesch等 [4]提出16-7周的小鼠禁食6小时，腹腔注射55mg/Kg的STZ，连续五天,相比AMDCC的方法，可以提高C57BL/6造模的成功率，节省资源、避免动物的浪费。因为不同品系的遗传背景不同，对STZ的易感性不同，使的造模成功率也不同。Gurley等鉴定出不同品系对低剂量STZ多次诱导糖尿病的易感性的顺序(DBA/2 C57BL/6 MRL/MP 129/SvEv BALB/c) [5] 。高剂量STZ诱导 AMDCC高剂量STZ诱导DN的方法是小鼠禁食4小时，150mg/Kg的STZ腹腔注射。高剂量STZ的细胞毒性更强，加速胰岛β细胞的破坏，导致造模小鼠糖尿病高发并且病情严重。高剂量STZ诱导的模型表现出更高的蛋白尿。但是高剂量的STZ同时会引起非特异性细胞毒性，高糖引起肾脏病叠加在STZ引起的肾毒性， 使结果不易解释[4][6]。然而，高剂量STZ诱导的DN模型仍被广泛接受和应用，因为上述STZ潜在的肾毒性不是占据主导地位的，观察到在补充胰岛素控制血糖的情况下，糖尿病损伤可以逆转 [7]。Chow等采用STZ 125 mg/kg腹腔注射C57BL/6小鼠，连续两天诱导DN。 通过胰岛素治疗可以阻断肾脏病理形成，提示STZ并没有表现出肾毒性，最后的造模成功率接近90% [8]。2　自发性糖尿病肾病动物模型该模型是指动物未经过任何有意识的人工处置，在自然情况下发生的糖尿病，或者由于基因突变的异常表现通过遗传育种保留下来的动物疾病模