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微生物第二章原核
环资学院 第二章微生物的形态和构造-原核生物 第一节:细菌 第二节:放线菌(自学) 第三节:蓝细菌(自学) 第四节:支原体、立克次氏体和 衣原体(自学) 第一节 原核生物的结构 三、染色 P27 活菌:用美蓝或TTC。 死菌:负染色:背景着色。 正染色:简单染色法:形态 鉴别染色法:结构 革兰氏染色法由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。 (一)细胞壁cell wall 定义:位于细胞最外的一层厚实,坚韧的外被,占细胞干重的10-25%。 功能: 固定外形和保护细胞免受外力的损伤 与细胞生长、分裂、鞭毛运动有关 阻拦有害物质进入细胞 与细菌抗原性、致病性和对抗生素、噬菌体的敏感性相关 1.革兰氏阳性细菌的细胞壁 (1)肽聚糖: 二糖单位:N—乙酰葡萄糖胺(NAG)和N—乙酰胞壁酸(NAM)两种氨基糖,通过β-1,4糖苷键相连相连形成长链。 肽尾:连接到NAM羧基的四肽链。 肽桥:连接前后两个四肽尾分子的桥梁作用。 肽聚糖网格状结构 磷壁酸teichoic acid(垣酸) 占壁干重10%。 甘油磷酸 核糖醇磷酸 磷壁酸功能 ?带负电荷,在细胞表面能调节阳离子浓度。 ?磷壁酸与细胞生长有关(调节自溶素活力) ?贮藏磷元素。 ?增强致病菌与宿主细胞的粘连,避免被白细胞吞噬以及抗补体的作用。 ?G+细菌特异的表面抗原。 ?噬菌体的特异性吸附受体。 2.革兰氏阴性细菌的细胞壁 内膜:2-3nm,紧贴细胞膜,由肽聚糖组成。占细胞壁的10%,单层或双层。与G+不同的是四肽尾中第3个氨基酸是m-DAP,没有特殊的肽桥。 外膜:8nm,表面不规则,切片呈波浪形。 脂多糖层LPS:Ca2+存在,才能维持稳定。 类脂A:G-菌内毒素毒性中心 核心多糖: O-特异侧链(O-抗原): 磷脂层: 蛋白质:脂蛋白:种类多,连接细胞壁的内、外膜。 孔蛋白:充水孔道。 外膜蛋白:与噬菌体吸附有关 LPS层的主要功能 ①构成某些革兰氏阴性细菌致病物质—内毒素的物质基础; ②起细菌自我保护作用. ③重要的抗原因子; ④是许多噬菌体吸附的受体。 ⑤吸附Mg2+、Ca2+等阳离子以提高其在细胞表面浓度的作用。 3.周质空间和黏合位点 又称壁膜空间。G-细菌外膜与细胞膜之间的狭窄空间,呈胶状。内含多种蛋白质。 黏合位点:G-细菌细胞壁外膜与内膜的直接接触点。功能是促进营养物质直接进入细胞。 4.革兰氏染色原理: 小结:革兰氏染色的机理 由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物,乙醇能使它溶解,所以染色的前二步结果是一样的,但在G+细胞中,乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水,导致孔隙变小,由于结晶紫和碘的复合物分子太大,不能通过细胞壁,保持着紫色。在G-细胞中,乙醇处理不但破坏了胞壁外膜,还可能损伤肽聚糖层和细胞质膜,于是被乙醇溶解的结晶紫碘的复合物从细胞中渗漏出来,当再用衬托的染色液复染时,显现红色。红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞,但被紫色盖没,红色显示不出来。 5、无壁细菌 实验室中形成 自发缺壁突变:L型细菌(L-form ) 人工方法去壁: 基本除尽:原生质体(protoplast) 部分去除:球状体(spheroplast) 自然界长期进化中形成: 支原体 去壁方法:加溶菌酶或青霉素。 (二)细胞膜plasma membrane和间体mesosome 细胞质膜,细胞壁和原生质之间一层柔软并具有半透性的生物膜(质膜、原生质膜、胞浆膜)。占细胞干重的10%,厚7-8nm. 1、细胞膜功能: ①控制细胞内外的物质运送(具有选择性)。 ②维持细胞内正常的渗透压 ③是合成代谢和能量代谢的场所, ?鞭毛着生处,提供鞭毛运动的能量 ?膜上某些蛋白受体与趋化性有关。 2.细胞膜的化学组成和结构 磷脂:20-30% 蛋白质:60-70% 基本结构是磷脂双分子层,含有高度疏水的脂肪酸和相对亲水的甘油两部分。由双层磷脂构成的质膜其疏水的两层脂肪酸链相对排列在内,亲水的两层磷酸基则相背排列在外。 质膜很薄,约7-8nm厚。蛋白质镶嵌在双层磷脂中,并伸向膜内外两侧。 周边蛋白(膜外蛋白):20-30%,与膜结合松散 整合蛋白
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