核桃青皮多酚氧化酶纯化及酶学性质研究.pdfVIP

第 52卷第 19期 湖北农 业科 学 Vo1．52No．19 2013年 10月 HubeiAgriculturalSciences Oct．．2013 核桃青皮多酚氧化酶纯化及酶学性质研究 王和利 ，陈迪新 ，王洪涛 (1．河南科技大学林学院，河南 洛阳 471003；2．河南大学生命科学学院，河南 开封 475001) 摘要 ：采用简化的方法对核桃(Juglansre)iaL．)青皮 中多酚氧化酶(PP0)进行纯化 ，并对其酶学性质进行 了研究。结果表明，核桃青皮PPO经过丙酮沉淀、金属螯合亲和层析 ，被纯化 了 1．42倍 ．回收率为0．21％ 以邻苯二酚为底物 ，该酶最适pH是6．0．最适温度是 20qC：抗坏血酸对核桃青皮PPO的活性有很强的抑 制作用 ，亚硫酸氢钠和柠檬酸也能抑制核桃青皮PPO的活性 ；当Cu。+浓度在 0．O1～0．05mmol／L时．Cu“对 PPO有激活作用．超过这个范围对PPO活性反而有抑制作用 关键词 ：核桃青皮：多酚氧化酶 (PPO)：纯化 ；性质 中图分类号：$664．1；Q55 文献标识码：A 文章编号：0439—8114(2013)19—4760—04 StudiesofPurification and Enzymatic CharacteristicsofPolyphenolOxidasein W alnut Green Husks W ANG He-li，CHEN Di-xin ，W ANG Hong-taoz (1．ForestryCollegeofHenanUniversityofScienceandTechnology，Luoyang471003，Henan，China 2．CollegeofLifeSciences，HenanUniversity，Kaifeng475001，Henan，China) Abstract：A simplifiedmethodforpuri~ingpolyphenoloxidasefrom walnut(Juglans iaL．)greenhuskswastested，and thecharacteristicsofpolyphenoloxidasewerestudied．Theresultsshowedthatthepolyphenoloxidase (PPO)ofwalnutgreen huskswaspurified by 1．42 timeswith acetoneprecipitation and metalchelate affinity chromatography．Therecovery ratewas 0．21％．Enzymatic characteristicswere studiedwith catecholassubstrate．TheoptimalpH ofthewalnutgreen husk PPO was 6．0，and the optimaltemperature was20℃ ；ascorbic acid had a distinctsuppression effecton PPO；sodium bisulfiteand citricacid could alSO inhibitthe activity ofwalnutgreen husk PPO．Copperion could activatePPO only in a certain eoneen— tration rangeofO．01—0．05mmol／L．while overthisrange，copperionwould inhibitthe activity ofPPO． Key words：walnutgreen husks；polyphenoloxidase