分子标记辅助甜瓜抗蔓枯病基因的聚合及品种改良-中国农业科学.PDFVIP

中国农业科学 2015,48(3):523-533 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.03.12 分子标记辅助甜瓜抗蔓枯病基因的聚合及品种改良 1 1 1 1 2 2 1 毕研飞 ，徐兵划 ，钱春桃 ，郭 静 ，张永兵 ，伊鸿平 ，陈劲枫 1 2 （南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室，南京 210095 ； 新疆农业科学院哈密瓜研究中心，乌鲁木齐 830091 ） 摘要：【目的】蔓枯病（gummy stem blight）是一种真菌性土传病害，是危害甜瓜生产的严重病害之一， 其存在生理小种的分化，品种即使仅携带单个抗病基因，仍会导致甜瓜抗性逐步降低甚至丢失。建立甜瓜抗蔓 枯病聚合育种的分子标记辅助选择体系，选育抗性高且不再分离的聚合抗源自交系和品质优良且高抗甜瓜蔓枯 病的改良白皮脆品种（品系），为甜瓜优质、抗病和高产育种提供一种简单、快捷的选择方法和重要的中间材料。 【方法】利用 5 份甜瓜单一抗源材料 PI140471、PI157082、PI511890、PI482398 和 PI420145 两两杂交获得 8 份聚合抗源（082-471、082-890、082-398、145-471、145-082、145-890、145-398 和 890-398）。利用 3 个不 同浓度的蔓枯病病菌孢子液（5×105 7 9 个/mL、5×10 个/mL、5×10 个/mL）对 8 份聚合抗源的 F 植株幼苗进行接 1 种鉴定。结合春、秋两季的接种鉴定结果，筛选得到 2 份聚合后抗性显著提高的基因组合 145-471 和 145-398。 一方面，以 145-471 和 145-398 为材料，利用苗期梯度接种鉴定、分子标记辅助选择以及农艺性状观察，对其 自交后代进行逐代筛选至 F。另一方面，选用组合 PI420145 和 PI140471 以及 PI420145 和 PI482398 作为蔓枯 7 病抗性基因的供体亲本，综合性状优良的感病甜瓜品种‘白皮脆’为抗性基因受体亲本。先分别单向回交 5 代， 在单个基因回交转移时，利用分子标记检测结合农艺性状观察对回交后代进行筛选。当回交后代的遗传背景得 到一定程度恢复后，再将 2 个方向的回交后代进行杂交，后自交 3 代稳定。【结果】聚合抗源对不同浓度的蔓枯 病菌均表现为抗，而单一抗源对不同浓度蔓枯病菌表现出选择性抗性且抗性水平低于聚合抗源。SSR 标记 CMCT505和CMTA170a在PI140471和PI482398上可分别扩增出189 bp和121 bp的特异性片段，SCAR标记SGSB1800 可以在 PI420145 上扩增出 1 800 bp 的特异性片段，而 145-471（145-398）的聚合单株可以同时扩增出 189 bp 和 1 800 bp（121 bp 和 1 800 bp）两条特异片段。聚合抗源 145-471（或 145-398）的自交 F7 世代以及改良白 皮脆 BC F 世代群体的分子标记鉴定结果显示，各单株已经成功聚合了 Gsb-1 和 Gsb-6 （或Gsb-4 和 Gsb-6 ）两 5 4 个抗病基因，抗性不再有分离且农艺性状稳定一致。初步建立了甜瓜抗蔓枯病聚合育种的分子标记辅助选择体 系，获得了两份表现高抗且抗性不再分离的聚合抗源自交系 F7 和 2 个以优质品种‘白皮脆’