厚颌鲂核型分析与DNA含量的测定.pdfVIP

第33卷 第 l期 华 中 农 业 大 学 学 报 Vo1．33 No．1 2014年 1月 JournalofHuazhongAgriculturalUniversity Jan．2O14，80~84 厚颌鲂核型分析与 DNA含量的测定 易少奎 张新辉 杨 坤 高泽霞 王卫民 华中农业大学水产学院／农业动物遗传育种与繁育教育部重点实验室 ／gv业部淡水生物繁育重点实验室，武汉 430070 摘要 为了解厚颌鲂 (Megalobramapellegrini)的细胞遗传学特征，分析了厚颌鲂的染色体核型并对其 DNA含量进行了测定。采用PHA和秋水仙素活体注射、肾细胞短期培养和空气干燥制片法，经Giemsa染色， 对厚颌鲂染色体数 目和核型进行研究，结果表明：厚颌鲂 2n一 48，染色体核型公式为24m+20sin+4st，臂数 NF=92，具有 1对特大染色体，未发现性染色体。以厚颌鲂外周血细胞为样本，鸡血细胞 DNA为标准 (2．3O pg)，使用流式细胞仪测定了厚颌鲂二倍体细胞的DNA含量，厚颌鲂 DNA含量为鸡血的1．23倍 ，绝对含量为 2．82Pg。 关键词 厚颌鲂；染色体 ；核型；DNA含量 中图分类号 S917 文献标识码 A 文章编号 1000—2421(2014)01—0080—05 厚颌鲂 (Megalobramapellegrini)隶属于鲤科 量的研究不仅是研究物种 间差别 的重要方法，而且 (Cyprinidae)鲔亚科 (Cultrinae)鲂属 (Megalobra— 对分类和系统演化的探讨、物种进化研究等具有参 ma)。曾一度被当作三角鲂 (Megalobramatarmi— 考意义[1川。笔者对厚颌鲂的染色体核型与DNA含 nalis)的同种异名，1930年，罗云林首次对厚颌鲂进 量进行分析，旨在 了解其细胞遗传特性，为厚颌鲂的 行了性状差异分析，确定为有效种ll1]。厚颌鲂分布 遗传育种研究和资源保护积累基础资料 。 仅限于长江上游地区，由于长江上游的水利建设导 1 材料与方法 致环境急剧变迁 ，加之存在较大的捕捞压力，其分布 范围和种群规模 已经呈明显的下降趋势 ]，属于长 1．1 试验材料 江上 游急切保 护 鱼类，研究和 保 护工 作 迫在 供试厚颌鲂于 2011年 9月采 自四川I省泸州市 眉睫 。 。 龙溪河，暂养于湖北省鄂州市团头鲂原种场，共 12 厚颌鲂作为鲂属中惟一分布于长江上游地区的 尾，雌雄各半，体质量为 150~300g。 物种，其研究主要涉及个体生物学、种群生物学、遗 1．2 厚颌鲂核型分析 传标记、毒理等方面[5]，还未见对其染色体及DNA 厚颌鲂肾细胞染色体标本的制备参照林义浩的 含量进行研究的报道。染色体是生物遗传物质的主 植物血球凝集素 (PHA)体 内注射法Ete]。按照 l1 要载体，其数 目和形态不仅具有种的特征，且能反映 Fg／g(g!体质量)的剂量腹腔注射 PHA，4h后再按 出生物进化的历史L9]。核型 (karyotype)是指生物 照8 g／g剂量注射秋水仙素，2h后剪鳃及断尾放 染色体的数 目、大小和形态特征的总和，是细胞遗传 血，15min后解剖鱼体取肾脏组织进行试验。染色 学的研究基础 。研究鱼类染色体核型对了解鱼类的 体玻片制备的具体步骤参考杨坤等l1。的制备方法。 遗传组成、遗传变异、系统演化、发育机制等具有重 将制备好的染色体玻片用 lO Giemsa染液染 要意义，同时还对预测种间杂交和多倍体育种结果 色 13min，最后用双蒸水缓缓冲洗 ，待玻片干燥后 的鉴定等问题都具有重要的意义[1。脱氧核糖核 在显微镜下选取 100个分散 良好、形态清晰、数 目完 酸(DNA)是绝大多数生物的遗传物质，细胞核中所 整的中期分裂相 ，用 AdobePhotoshop12．1软件系 含的DNA总量对于物种是一定 的。生物 DNA含 统手工统计每个分裂相的染色体数 目，找出出现频 收稿 日期：2叭2O3—27 基金项 目：现代农业产业技