细胞分离分析仪器--离心机.pptVIP

（二）密度梯度离心(isodensity centrifugation) 用介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过离心力场的作用使细胞和细胞成分分层、分离。按照离心分离原理，密度梯度离心又可分为两种类型： 速率区带离心法（ rate-zonal) 等密度离心法（ Isopyonic ） * 优点： ①分离效果好，可一次获得较纯颗粒。 ②适应范围广，能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒，又能分离有一定浮力密度差的颗粒。 ③颗粒不会挤压变形，能保持颗粒活性。 * 常用介质：氯化铯、蔗糖、多聚蔗糖、甘油。 分离活细胞的介质要求： 1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高； 2）PH中性或易调为中性； 3）浓度大时渗透压不大； 4）对细胞无毒。 对于大多数离心来讲，蔗糖是比较合适的梯度材料。尽管它在高密度（30% W/N）时粘性较大，但综合比较表明它可以广泛应用。当蔗糖分离一些对渗透性敏感的生物体组份时，其高渗透性就会对样品有影响，这时需要选择其他梯度材料，如由pharmacia公司开发的Ficoll等等。 * 1. 速率区带离心法 velocity sedimentation 用途：分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。 特点：介质密度较低，介质的最大密度应小于