急性髓系白血病112例流式细胞术检测免疫表型探究.docVIP

急性髓系白血病112例流式细胞术检测免疫表型探究 　　[摘要] 目的 探讨流式细胞术检测在急性髓系白血病诊断中的意义。 方法 回顾分析在该院就诊初治的急性髓系白血病患者（AML）112例，采用流式细胞术CD/SSC双参数散点图设门的方法对患者骨髓细胞进行12种抗原监测，并结合FAB法则对其进行标准分类，并对不同亚型中抗原表达的差异性进行有效比较。 结果 在112例初治的急性髓系白血病患者中，表达指数最高的是CD、CD、CD，分别为100%、94.5%、77.9%。而在淋系抗原中，CD的表达指数最高为30.5%，其次为的CDl9、、26.9%、CD的16.7%。而且有些免疫表型与FAB法则分类具有一定的相关性。 结论 在急性髓系白血病诊断中运用流式细胞术检测有助于急性髓系白血病患者诊断和分型的准确性，对于急性髓系白血病患者选择治疗方案以及预后的判断具有重要意义。 [关键词] 急性髓系；白血病；流式细胞术；免疫表型 [中图分类号] R733 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2013）05（a）-0174-02 急性髓系白血病包括所有非淋巴细胞来源的急性白血病，是一种具有高度异质性特性的疾病群，可由正常的髓系细胞分化发育过程中不同阶段的造血祖细胞恶性变转化而来[1]。其发病原因及发病机制相对复杂，目前世界临床医学界普遍认为，大多白血病引发因素是由于环境因素与细胞遗传物质相互作用造成的。由于AML患者本身白细胞质量差，自身抵抗力底下，患者被感染几率高，治疗困难且并发症多。而且常伴有皮肤黏膜出血最常见为眼底、球结膜的出血现象。流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是一种在功能水平上对液流中单列的细胞或者是其它微生物粒子快速逐一的进行筛选以及定量分析的检测手段[2]，同传统的荧光镜检查相比，其具有高速、精准、多用途等优点，在基础研究和临床实践被广泛的运用，且在细胞生物学、血液学、免疫学、遗传学及临床检验等各领域各学科中也发挥着重要的作用。为了探讨流式细胞术检测在急性髓系白血病诊断中的意义，该文回顾2006年6月―2012年6月在该院就诊初治的急性髓系白血病患者108例，采用流式细胞术CD/SSC双参数散点图设门的方法进行骨髓细胞的12种抗原监测，并结合FAB法则分类对不同亚型中抗原表达差异进行比较。现将结果报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取在该院就诊初治的急性髓系白血病患者112例，其中成人104例，男68例，女36例；儿童8例，男3例，女5例。年龄均在13～75岁之间，平均年龄48岁。根据FAB法则标准进行分类：M患者30例，占总数的26.8%；M患者20例，占总数的17.8%；M患者26例，占总数的23.2%；M患者36例，占总数的32.2%。 1.2 试剂与材料 抗体髓系：CMPO、CD、CD、CD、CD、CD；T系列：CD；B系列：CD、CD、CD、CD；干祖细胞标志：CD。标本骨髓2 mL，使用肝素抗凝；激发光选择氩离子（480nm），流式细胞仪器选用EOICS XL，24 h内行常规方式检测；CY5荧光设置在FL-4，藻红蛋白设置在FL-2，异硫氰酸荧光设置在FL-1，对荧光微球严格进行标准校准后再行检测。 1.3 检测方法 该研究该院采用流式细胞术CD/SSC双参数散点图设门的方法对患者骨髓细胞进行12种抗原监测。首先对所有患者均采集骨髓，在6 h内完成流式细胞术检测。肝素抗凝骨髓液1～2 mL，在每个试管中分别加入20 L有4种荧光标记的抗体，以及100l骨髓。在室内避光进行培养，培养时间为20 min[3]。加入2 mL红细胞裂解液，混匀后在室内避光条件下无菌培养10 min。离心后弃上清液取沉淀物并用磷酸盐缓冲液洗涤1次，加入0.5 mL的磷酸盐缓冲液，上机等待检测。 1.4 判断标准 结果以胞质抗原表达抗原表达10%、白血病细胞表面表达20%为阳性。 1.5 统计方法 将所有相关数据，全部采用SPSS14.0数据处理系统进行处理并对组间比较采用配对四格表资料的χ2检验。 2 结果 112例急性髓系白血病患者均表达2个以上的髓系抗原，其中CD的阳性率最高，占100.0%，其次为CD、MPO，阳性率分别为94.5%和84.2%。CD的表达指数最高为30.5%，其次为的CDl926.9%、CD的16.7%。见表1。 3 讨论 做为髓系白血病的特异性标CD、CD、MPO，其表达率的的检测是临床髓系白血病的鉴别的标准之一。此次检测中他们的表达率分别为100%、94.5%、84.2%与很多报道文献相符合。而在淋系抗原中，CD的表达指数最高为30.5%，其次为的CDl9 的2