聚酰胺薄层色谱法.PPTVIP

基本要求:熟练掌握各种分析方法和操作技术，培养独立开展中成药分析工作的能力。 注意事项： 1. 实验前做好预习，明确目的要求，熟悉原理和操作要点。 2. 严格按实验规程操作，细心观察实验现象。 3. 及时做好完整而确切的原始记录。 4. 取用试剂、药品应仔细观察标签，杜绝错盖瓶盖的现象。 5. 爱护仪器，小心使用。精密仪器须经教师同意，用毕签名。 6. 注意防火、防爆。发现事故苗头及时报告，不要擅自处理。 7. 爱护公物，节约水、电、药品和试剂。 8. 实验完毕应认真清理实验台，经老师同意后，方可离开。 值日生整理试剂台、打扫卫生、检查水、电、门窗。 9. 认真总结实验结果，填写实验报告，并按规定时间上交。 实验一、二妙丸的鉴别与挥发油的测定 一、目的要求 1. 掌握薄层色谱法在中成药鉴别中的应用。 2. 熟悉挥发油测定方法。 苍术:菊科植物茅苍术Atractylodes lancea Thunb. DC.或北苍术Atractylodes chinensis DC. Koidz.的干燥根茎。 成分：挥发油中主要含有苍术酮、苍术素、β-桉油醇、茅术醇等。 5.黄柏的鉴别： TLC法，以小檗碱和黄柏对照药材作对照。 6.挥发油的提取：水蒸气蒸馏法。 7.挥发油组成测定：TLC法，经香草醛浓硫酸显色后，苍术酮显橙红色，苍术素显污绿色，β-桉油醇和茅术醇显紫红色。 三、实验内容 1. 黄柏的鉴别 供试品溶液：取本品0.1g，置具塞试管中，加甲醇5ml，超声提取10分钟，取滤液。 色谱条件： 薄层板：硅胶G 展开剂：三氯甲烷-甲醇-浓氨试液 （50∶10∶0.5），展开缸预先用氨 蒸气预饱和 检视：紫外光灯（365nm）下。 点样量： 5μl 结果：供试品色谱中，在与对照品色 谱及对照药材色谱相应的位置上， 显相同的黄色荧光斑点。 2. 挥发油的测定 取烧瓶，加水300ml与玻璃珠数粒，称取供试品约60g，置烧瓶中，振摇混合后，连接挥发油测定器与冷凝管。从冷凝管上端加水约200ml，使充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶为止。 用直火缓缓加热至沸，并保持微沸1小时，停止加热，放置片刻，开启测定器下端的活塞，将水缓缓放出，至油层下降至其上端恰与刻度0线平齐，读取挥发油量，并计算供试品中挥发油的含量（%）。 挥发油含量 = V / W×100% 其中V=挥发油的体积(ml)；W=供试品的重量(g) 3. 苍术挥发油组成 吸取挥发油少量，置干燥小瓶中，加乙醚1ml，加少量无水硫酸钠，上清液作为供试品溶液。吸取供试品溶液5μl，点于硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（85︰15）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，供试品的色谱中，出现橙红色、污绿色二个主斑点。 四、实验记录 1.绘制黄柏鉴别的薄层色谱图。 2.绘制挥发油测定仪器装置图，记录实验中的重要步骤及出现的问题，计算本品挥发油的含量。 3.绘制苍术挥发油薄层色谱图。 五、思考题 1. 本法测定挥发油的原理是什么？若挥发油相对密度为1.0以上如何设计实验？ 2. 挥发油测定的意义。 3. 什么是对照品和对照药材？ 实验二、注射用双黄连（冻干）的鉴别与检查 一、目的要求 1. 掌握薄层色谱法在中成药鉴别中的应用 2. 熟悉注射剂杂质检查的目的、原理及操作方法 金银花:忍冬科植物忍冬Lonicera japonica 、红腺忍冬 L. hypoglauca 、山银花 L. confusa 或毛花柱忍冬 L. dasystyla 的干燥花蕾或带初开的花。 成分：主要含有绿原酸（Chlorogenic acid）、异绿原酸（Isochlorogenic acid）木犀草素（Luteolin）以及挥发油。 连翘：木犀科植物连翘Forsythia suspense 的干燥果实 成分：主要含有连翘酯苷（Forsythoside）A、B、C和D、连翘酚（Forsythol）、连翘苷（Phillyrin）、齐墩果酸（Oleanolic acid）和熊果酸（Ursolic acid）等 5.黄芩与金银花的鉴别 ： 聚酰胺薄层色谱法， 以黄芩苷和绿原酸对照品溶液、黄芩和金银花阴性对照液作对照 7.注射剂杂质检查项目： 蛋白质——加磺基水杨酸或鞣酸检查 鞣质——加鸡蛋清或明胶氯化钠试液检查 重金属——不得超过百万分之十 砷盐——不得超过百万分之二 草酸盐——加氯化钙检查 钾离子检查——加四苯硼酸钠检查 树脂检查——加盐酸或冰醋酸检查