表皮生长因子对人毛囊外毛根鞘无色素性黑素细胞增殖、迁移能力的影响Effect of epidermal growth factor on the proliferation and migration of pigment melanocytes in the outer hair root sheath of human hair follicles.pdfVIP
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表皮生长因子对人毛囊外毛根鞘无色素性黑素细胞增殖、迁移能力的影响Effect of epidermal growth factor on the proliferation and migration of pigment melanocytes in the outer hair root sheath of human hair follicles
目 录
1 表皮生长因子对人毛囊外毛根鞘无色素性黑素细胞增殖、迁
移能力的影响………………………………………………】
1.1中文摘要………………………………………………………1
1.2英文摘要………………………………………………………4
1.3前言……………………………………………………………7
1.4材料与方法…………………………………………………10
7
1.5结果…………………………………………………………1
1.6讨论…………………………………………………………22
1.7结论…………………………………………………………29
1.8参考文献……………………………………………………30
1.9英汉缩略词对照表…………………………………………34
2 致谢…………………………………………………………35
3 毛囊外毛根鞘无色素性黑素细胞与白癜风(综述)………36
表皮生长因子对人毛囊外毛根鞘无色素性黑素细胞增殖、迁
I
㈣必
移F挈摘 要 f叫‘!y55
目的: 观察不同浓度的表皮生长因子(Epidermalgrowth
root
factor,EGF)对毛囊外毛根鞘(outsheath,0RS)无色素性黑
ic
素细胞(amelanot
影响。方法:与头皮提供者沟通获得同意后。取头皮并去除脂肪组织
及真皮上1姗。采用1%分散酶II消化获得毛囊。再采用0.5%胰蛋白
酶消化获得外毛根鞘细胞。在含有经Chelex100钠形式螯合后的胎
牛血清的专用McDBl53培养基中原代培养。采用差胰酶法传代纯化
AMMC细胞。将纯化并传至第三代的细胞,用免疫组织化学染色法鉴
10ng/m1、20ng/ml、50ng/m1浓度EGF干预组。(1)按照分组条件
48小时后。采用CCK8检测法检测各组
采用不同浓度EGF干预A删C
细胞的增殖能力。(2)将上述经鉴定后的第三代的AMMC,用无血清
MCDBl53饥饿24h后,采用Transwell体外小室迁移实验检测不同
浓度EGF干预A删C48小时后各组细胞的迁移能力。所测得的结果用
;±s统计,应用11.5版本的SPSS统计软件,行单因素方差分析。
确定检验水准为尺0.05。结果:人毛囊外毛根鞘的无色素性黑素细
100钠形式螯合后的胎牛血清以及各种添加因子
胞在含有经Chelex
的专用McDBl53培养基中可以有效的扩增。通过采用差胰酶法传代
A埘C细胞可以有效的纯化A删C。A删C在体外能够连续、稳定的传代。
传至第三代的细胞,用免疫组织化学染色显示其NKI/beteb染色阳
0.1968±O.1763,lng/m1 EGF
EGF干预组0.7414±0.2177,
干预组0.6302±0.2292,20ng/ml
50ng/ml
EGF干预组
10ng//mlEGF干预组、20ng/mlEGF干预组、50ng/ml
EGF干预组、
EGF干预组的0D值低于10ngJ/ml
(尸均O.05)。1ng/m1
EGF干预组(尸均0.05)。空白对
20ng/mlEGF干预组、50ng/m1
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