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麻醉药与脂筏相互作用摘要麻醉剂诱导细胞膜介导的修饰的机制仍然是一个悬而未决的问题。尽管麻醉分子在细胞膜上的流化作用被广泛认同，但是尚不知道麻醉剂是否显示出对特定膜结构域的作用，即脂筏。这些膜微结构域的重要性来自于它们与细胞信号传导途径以及特异性药物相互作用相关联的事实。这项工作的目的是通过比较麻醉剂与各种脂质组成的膜的相互作用来说明这个问题。选择用POPC，鞘磷脂和胆固醇等摩尔混合物制备的脂质体作为脂筏的模型。研究了这些脂质体与两种局部麻醉剂，丁卡因、利多卡因和一种全身麻醉剂异丙酚的相互作用。通过比较与POPC / SM脂质体和POPC / SM / CHOL脂质体的麻醉相互作用来研究胆固醇的作用。本试验使用以下实验技术：具有耗散的石英晶体微量天平，差示扫描量热法和磷核磁共振法。虽然在不同的条件和技术手段下研究的脂质体，但是可以从所采用的所有实验技术获得的信息以得出一般结论。丁卡因与筏状结构域更多地相互作用，利多卡因对POPC / SM脂质体诱导更强的修饰，丙泊酚的结果不完全确定，但它似乎是最不容易与脂质相发生互作用。引言虽然麻醉机制已经被研究了多年，麻醉剂与神经细胞膜的相互作用位点仍然是研究的对象。提出这种相互作用的两个主要理论是直接结合蛋白质和围绕功能蛋白质的膜脂质的扰动（Frangopol和Mihailescu，2001; Tsuchiya和Mizogami，2008; Tsuchiya等，2010a，2011）。有证据支持两个假设，脂质相互作用假说是由麻醉效力与细胞膜流化诱导能力密切相关的事实表明的（Boren et al。，2007）。然而，当诱导流化时，不知道麻醉剂是否表现出对特定膜结构域的任何作用。脂筏在生物膜领域最近引起了极大的关注。尽管相对于物理性质甚至脂筏的存在还存在许多未解决的问题（McIntosh，2007），但已经收集了关于它们在与细胞信号传导途径，膜运输和信号转导相关的膜活性中的作用的证据（McMullen等，2004; Heerklotz，2002; Holland等人，2006）。脂筏的修改可能导致像阿尔茨海默病，帕金森病，朊病毒疾病和癌症等疾病（Holland等，2006; Giocondi等人，2004; Patra，2008）。此外，一些药物通过与脂质筏优先相互作用来启动在细胞中的作用（Patra，2008; Ausili等人，2008; Falck等人，2006），而毒素和病原体将其用作优选的进入位点（Holland等， 2006）。脂质筏是在生理温度处于液体有序相（Lo）中的瞬时微畴，其具有在凝胶和液晶相之间的中间特性，与处于流体像液体无序相（Ld）（McMullen等人，2004; Edidin，2003; London，2005; Hanzal-Bayer和Hancock，2007; Almeida等人，2009）。通常，使用高熔点温度（Tm）脂质（与饱和酰基链），低熔点脂质（不饱和酰基链）和胆固醇（CHOL）的三元混合物作为浮筏混合物。鞘磷脂（SM）似乎是最合适的高Tm脂质，因为它能使氢键与胆固醇的羟基结合，并且它存在于许多细胞类型的天然膜上。对于低Tm脂质，一个好的选择是1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油基-3-磷酸胆碱（POPC），因为它是细胞膜中最相关的磷脂酰胆碱，通过从生物来源提取发现。由POPC / SM / CHOL等摩尔混合物组成的所谓“标准筏混合物”被认为是一种准确的模型（Holland等，2006）。虽然这些混合物具有比细胞膜更简单的脂质组成，但它们的相行为产生了从细胞提取的天然脂筏的相行为相似（Onuki和Takayama，2010）。在这项工作中，研究了几种麻醉剂和脂筏之间的相互作用。在之前的研究中，Tsuchiya等（2010b）无法检测到酰胺类麻醉药与脂筏之间的任何优先相互作用。据我们所知，没有其他研究涉及麻醉和筏状膜。为了模拟这些筏的脂质组成，由三元混合物POPC / SM / CHOL（1:1:1，摩尔比例）组成的单层脂质体。由于SM和POPC的二元混合物也已知在更加刚性的富含SM的结构域和更加流体的富含POPC的结构域中相分离（Giocondi等人，2004），所以将研究POPC / SM（1：1，摩尔比例）的二元混合物，以了解胆固醇如何影响麻醉/脂质相互作用。使用两种类型的模型膜，这取决于测量技术：在使用差示扫描量热法（DSC）和磷核磁共振（31P NMR）光谱的研究中，在具有耗散的石英晶体微量天平（QCM-D）和悬浮液实验中的脂质体层。使用三种麻醉剂：丁卡因，酯类的局部麻醉剂; 利多卡因，一种局部麻醉剂的酰胺型; 异丙酚，全身麻醉。表1给出了这些分子的化学结构和pKa值。这些值的分析显示，在中性pH下，丙泊酚具有最高的带电分子浓度，而利多卡因呈现