食用油脂中脂肪酸的综合检测法.doc

附件3 食用油脂中脂肪酸的综合检测法 BJS 201712 范围 本方法适用于食用植物油（花生油、大豆油、玉米油、植物调和油、橄榄油、葵花油、芥花油、菜籽油、香油、棕榈油）是否的检测及识别。 方法原理 将样品甲酯化，采用内标法测定脂肪酸甲酯含量，根据脂肪酸甲酯判定异常，对样品排查确认。 试剂和材料 试剂 正己烷：色谱纯。 甲醇：色谱纯。 无水硫酸钠分析纯。 ：。三氟化硼甲醇溶液%。 溶液配制 含2%氢氧化钠的甲醇溶液：准确称取2 g氢氧化钠）于烧杯中，加入甲醇），超声至氢氧化钠完全溶解，移入100 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。 15%的三氟化硼甲醇溶液：取50%三氟化硼甲醇溶液）30 mL，缓慢加入到70 mL甲醇）的烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀。 标准物质 十一碳酸甘油三酯（C36 H68O6CAS：13552-80-2）标准品，纯度98%。 十一碳酸甲酯C12H24O2，CAS：1731-86-8）标准品，纯度99%。 脂肪酸甲酯混合标准溶液，各组分参考附录A。 标准溶液 十一碳酸甘油三酯内标溶液（1000 mg/L） 称取0.10 g（精确至0.0001 g）十一碳酸甘油三酯，加入50 mL甲醇溶解，移入100 mL容量瓶中，以甲醇定容，制成储备液。储备液于-20 ℃可冷藏保存个月。使用时以甲醇稀释成50 mg/L的中间液，现用现配。 十一碳酸甲酯内标溶液（1000 mg/L） 称取0.10 g（精确至0.0001 g）十一碳酸甲酯，加入50 mL正己烷溶解，移入100 mL容量瓶中，以正己烷定容，制成储备液。储备液于-20℃可冷藏保存个月。使用时以正己烷稀释成50 mg/L的中间液，现用现配。 脂肪酸甲酯标准溶液 将脂肪酸甲酯混合标准溶液从安瓶中完全转移至10 mL容量瓶中，用正己烷定容，于-20 ℃冷藏可保存一周。 根据需要稀释成适当浓度的含5.00 mg/L十一碳酸甲酯内标的标准工作溶液，现用现配。 仪器与设备 （40 ℃～100 ℃）±1 ℃0.1 mg。步骤 称取样品0.1 g（精确至0.1 mg）于250 mL烧瓶中，加入十一碳酸甘油三酯内标μg），加入2%氢氧化钠甲醇溶液8 mL，混合摇匀，连接回流冷凝器在80 ℃水浴上回流，直至油滴消失；从回流冷凝器上端加入15%三氟化硼甲醇溶液7 mL，继续回流2 min；用去离子水冲洗回流冷凝器，继续加热1 min；从水浴上取下烧瓶，迅速冷却至室温，准确加入10 mL正己烷，振摇2 min，吸取上层正己烷，无水硫酸钠，0.22 μm的有机相滤膜待GC/MS检测。 仪器条件 色谱柱：毛细管色谱柱（DB-23，60 m×0.25 mm×0.25 μm） b.载气：高纯氦气 c.载气流量：1.0 mL/min d.进样口温度：270℃ e.程序升温：60 ℃持续3.0 min； 60 ℃～160 ℃15 ℃/min；保持0 min； 160 ℃～0 ℃，升温速率8 ℃/min；保持0 min； ℃～0 ℃，升温速率3.15 ℃/min；保持10 min。 f.进样方式：分流，分流比51。 g.进样体积：1.0 μL h.离子源：EI，70 eV i.离子源温度：230 ℃ j.四极杆温度：150 ℃ k.接口温度：270 ℃ l.定量分析为选择离子扫描（SIM），种脂肪酸甲酯的保留时间、定性及定量离子见表。 表 14种脂肪酸甲酯的保留时间、定性和定量离子序号 脂肪酸甲酯 定量离子(m/z) 定性离子(m/z) 保留时间(min) 1 C6:0 74 87、99、59 2 C8:0 74 87、127、59 3 C10:0 74 87、143 12.23 4 C11:0（内标） 74 87、200、143 5 C12:0 74 87、143、183 6 C13:0 74 87、143、185 7 C14:0 74 87、143、199 1 8 C14:1n5 74 87、166、208 1 9 C15:0 74 87、143、213 1 10 C16:1n7 74 87、194、236 11 C17:0 74 87、143、284 1.42 12 C18:2n6t 67 81、95、294 13 C20:3n6 79 67、95 20.79 14 C20:4n6 79 91、6