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蛋白质组学技术在骨关节炎探究中应用探析 　　[摘要] 目的 通过了解骨关节炎的发病机理，针对性提出相应的治疗方案，使得骨关节炎能够得到更好的治疗，取得满意的临床效果。该文主要是对蛋白质组学技术应用在骨关节炎中进行研究讨论。方法 通过探讨蛋白质组学的研究方法以及各种类型骨关节样本的前处理方法以及应用情况等。初步了解蛋白质组学技术在骨关节炎中的应用情况。通过蛋白质组学技术初步研究骨关节炎，能进一步明确骨关节炎的发病机制以及相应的有效的治疗方法。 [关键词] 蛋白质组学；骨关节炎； 应用 [中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2013）05（c）-0191-02 随着科技的发展以及人类对于基因的研究深入，生命科学已经进入一个后基因组学的时代。其中蛋白质组学是其中一个后基因组学时代的一个研究热点。蛋白质组学是指研究生物体或者细胞内的蛋白质组成以及其相应规律的科学。主要是通过对样品进行前处理后，对样品中的蛋白质以及多胎碎片进行分离以及鉴定，同时对比数据库中的蛋白质数据从而得到相应的生物信息。这对于病因不明确的疾病，了解其致病发病的机理以及治疗途径等均有着显著的积极影响。骨关节炎症是一种慢性疾病，对于患者的日常生活质量影响较大。目前临床上对于骨关节炎的治疗仍未有治疗效果较为满意的手段。通过了解骨关节炎的发病机理，针对性提出相应的治疗方案，使得骨关节炎能够得到更好的治疗，取得满意的临床效果[1]。该文主要是对蛋白质组学技术应用在骨关节炎中进行研究讨论。 1 蛋白组学技术 蛋白组学技术研究主要是围绕两种蛋白组学进行研究探讨。一种是表达蛋白质组学，这主要是应用在生命科学的基础研究；另一种是功能蛋白质组学，主要是研究与疾病有关的患者出现个体差异的表达蛋白质。对于临床上研究，主要针对功能蛋白质组学进行一系列相关的研究。临床蛋白质组学主要是针对以下几个方法进行探讨，其中包括疾病模型蛋白质组学研究、疾病生物标记物的研究、药物蛋白质靶向药物的研究。低丰度蛋白质在人体生命活动调节中起着重要的作用，因此蛋白质组学的研究热点以及研究的难点主要是对低丰度蛋白质的分离以及鉴别。目前对于低丰度蛋白质的研究测定主要是通过两种分析技术进行分析研究，最常用的是双电泳技术以及质谱分析技术。这两种技术共同特点是能够分离样品中的杂质同时能够定量测定样品中目标物质的含量。由于蛋白质的分子相对较大，而且较容易变形，因此对于蛋白质的研究，样品的前处理是相对较为关键的步骤[2]。双电泳技术主要是通过凝胶电泳将蛋白质进行高效的分离后，得到转录后的蛋白质异构体，然后通过数据的查询对比，以及根据测定样品的等电位点以及分子量等信息，分析样品的生物活性以及根据斑块的大小等进行定量分析。而质谱技术主要是对样品进行离子化，对蛋白质样品进行蛋白质的分子量以及氨基酸序列的分析。质谱技术属于半定量的分析方法，可以串联其他技术与质谱技术一起进行分析定量鉴别使用。 2 骨关节蛋白组学研究 人体关节中一般包括有三大标本部分，分别是软骨标本、关节液标本以及滑膜标本。不同的标本类型有着不同的处理方法。在蛋白组学中样品的前处理是整个研究过程中较为关键的环节。以下将对各种不同关节类型的样品的前处理进行分析讨论。 2.1 软骨关节前处理 其中软骨标本包括软骨细胞以及软骨蛋白组学的研究。其中软骨细胞分离主要是在胰蛋白酶或者胶原酶在接近人体体温37℃进行软骨细胞的分离，然后在DMEM以及10%的FCS的条件下进行软骨细胞的培养。培养后需要手机软骨细胞进行原代培养，主要是利于胰蛋白酶的消化作用进行收集以及培养。然后在采用尿酸溶解缓冲液提取蛋白质，即可完成前处理。而软骨蛋白质组学的研究则主要是在-80℃的条件下进行粉碎，然后在NaCL以及HEPES的缓冲液中进行蛋白质的提取，采用CPC沉淀的方法将聚集蛋白聚糖去除，然后进行蛋白质的沉淀，经过DOC以及TCA的样本洗涤后，在尿酸溶解缓冲液中溶解，然后进行软骨的蛋白质组学研究[3]。 一般对于关节炎病理的研究主要是采用动物模型。一般采用小鼠作为实验动物，这是由于小鼠的个体差异较少，并且其对照较好，因此主要应用在骨关节炎的研究中。目前一些研究已经在病理状态下以及正常状态下找到两者蛋白质的差异，对于发病机制等仍需要进一步研究探索。 2.2 关节液的蛋白质组学研究 对于关节液的前处理，主要有以下几步。采集关节液的标本后，需要采用亲和力较强的色谱进行白蛋白以及IgG的去除。然后采用DOC/TCA对样本进行洗涤沉淀蛋白后将样品溶解在尿素溶解缓冲液中，将蛋白质溶解，即可进行关节液的蛋白质组学研究。 关节液主要是在骨关节中起到润滑的作用，关节液中含有部分从软骨关节中释放的蛋白质。这部