不同形态、用量培养基对黄皮洋葱试管苗生长影响.docVIP

不同形态、用量培养基对黄皮洋葱试管苗生长影响摘 要：以黄皮洋葱鳞茎为试材，以MS+BA 0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L为基础，White+BA 0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基为对照，研究了培养基的形态（固态和液态）及用量对洋葱试管苗生长的影响。试验结果表明，MS液体培养基优于MS固体培养基，其用量以50 mL三角瓶中放15 mL培养液最佳。 关键词：洋葱；培养基；试管苗 中图分类号：S633.2 文献标识码：A 文章编号：1001-3547（2013）16-0041-03 洋葱学名Allium cepa L.，别名葱头、圆葱、胡葱、玉葱，是百合科葱属草本植物，具有极高的营养价值和药用价值，它不仅能够改善食物风味，而且具有杀菌、抗肿瘤、降血压、抗血栓及动脉硬化等生理功能，耐寒，喜温，适应性强，产量高，易栽培，耐贮运且供应期长，对调节淡季蔬菜供应具有重要作用[1]。茎尖培养是进行洋葱脱毒、生产无毒种苗、恢复优良种性的有效手段[2，3]。姜璐琰等[4]研究了洋葱胚状体的诱导及再生系统的建立。徐启江等[5]对分蘖洋葱试管鳞茎微繁技术进行了研究。但对洋葱鳞茎快繁环节中培养基形态和用量的研究鲜有报道，特进行了此次试验，以期获得洋葱鳞茎的最佳培养体系。 1 材料与方法 1.1 试验材料 试验材料为黄皮洋葱鳞茎，购自甘肃省张掖市甘州区某蔬菜超市；50 mL三角瓶。 1.2 试验处理 设3组试验，每组试验设4个处理。第一组MS固体培养基不同用量试验，处理A1为50 mL三角瓶放入培养基10 mL，处理B1为15 mL，处理C1为20 mL，处理D1为25 mL。第二组MS液体培养基不同用量试验，处理A2为50 mL三角瓶放入培养液10 mL，处理B2为15 mL，处理C2为20 mL，处理D2为25 mL。第三组White固体培养基不同用量试验，处理A3为50 mL三角瓶放入培养基10 mL，处理B3为15 mL，处理C3为20 mL，处理D3为25 mL。 1.3 试验方法 调整培养基pH值至5.8，消毒灭菌后于无菌条件下用茎盘切割方式切取0.3～0.5 mm洋葱鳞茎为外植体，接种到MS+BA 0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基（固体或液体）和White+BA 0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基（固体）上，鳞茎每一处理接种10瓶，每瓶接种6个切段，然后放置在相同条件下培养。培养10、20、30 d时分别随机抽取每处理5瓶30株调查，观察植株生长发育动态，记载叶片数、茎节数、株高、发根数、小苗长势、叶片状态、小苗状态等。 ①无菌材料的获得、接种 剥去洋葱葱皮，用自来水冲洗10 min左右，采用茎盘切割的方式切取外层鳞茎上半部0.3～0.5 mm为外植体，将外植体放入75%酒精消毒灭菌30 s，再放入0.1% HgCl2消毒灭菌10 min，用无菌水认真冲洗4次。在超净工作台接种到培养基上，进行无菌培养。 ②培养条件 培养温度（25±2）℃，光照强度 2 000～3 000 lx，光照培养16 h，暗培养8 h。 2 结果与分析 2.1 MS固体培养基不同用量对试管苗生长的影响 由图1可知，MS固体培养基不同用量对洋葱试管苗的生长影响比较明显，鳞茎在MS固体培养基上前期生长无差异，叶片数、茎节数、株高、发根数都基本一致；后期试管苗差异很大，从10～20 mL范围内试管苗叶片数、茎节数、株高、发根数都随培养基用量的增加而增加，20 mL时达到最大值， 20 mL以后试管苗生长无明显变化。表明MS固体培养基用量过多会超过洋葱试管苗生长所需的营养而造成浪费。由此可见，50 mL三角瓶放入20 mL是MS固体培养基的最佳用量。 2.2 MS液体培养基不同用量对试管苗生长的影响 由图2可知，随着培养液用量的增加，洋葱试管苗叶片数、茎节数、发根数、株高先增大后逐渐减小，至15 mL时洋葱试管苗叶片数、茎节数、发根数、株高达到最大值；20 mL以上时洋葱试管苗的各项指标逐渐减小。表明液体培养基用量过多会使接种的切段浸没于其中，因缺氧而不易发芽，导致试管苗生长势弱。因此，50 mL三角瓶放入15 mL是MS液体培养基的最佳用量。 2.3 White固体培养基不同用量对试管苗生长的影响 由图3可知，鳞茎在White固体培养基上生长差异较小，随着培养基用量的增加，叶片数、茎节数、株高、发根数都随着培养基用量的增加而增加，25 mL时达到最大值。White固体培养基为低浓度盐培养基，其营养元素与前两组基本相同，pH值和培养条件也相同，至25 mL时洋葱试管苗的各项指标达最大值，这与营养元