槲皮素通便功能机制研究及松针槲皮素提取工艺的优化研究Study on the functional mechanism of quercetin and the optimization of the extraction process of quercetin from pine needles.pdfVIP

槲皮素通便功能机制研究及松针槲皮素提取工艺的优化研究 专业：劳动卫生与环境卫生学 硕士生：张晋蔚 导师：雷毅雄 陈骁熠 广州医科大学 公共卫生学院 摘要 背景与目的 慢性传输型便秘(slow transit constipation，STC)是慢性便秘中最常见的一种，是结肠传 输功能障碍导致的肠动力减弱、肠内容物传输缓慢的顽固性便秘，主要表现为排便次数减少 和便意减弱甚至消失，多数患者伴有腹胀、纳呆等症状。目前已有研究针对这些因素进行 STC 的调理和干预，但效果并不理想。因此探讨STC 的发病机制，继而采取对因治疗成为 目前研究热点。 然而STC 的发病机制尚不清楚。近年来，对STC 的机制研究有了新的方向。有研究发 现，肠黏膜上皮的功能在 STC 的发生和发展的过程中有着重要的作用。首先，正常的肠黏 膜上皮是组成肠屏障功能最重要的组成部分。一旦肠屏障受到破坏，会出现肠功能障碍。其 次，肠粘膜上皮能够调节肠内激素、液体的分泌，从而影响肠道的蠕动。同时，STC 中水 通道蛋白（AQPs ）表达的增高使结肠黏膜增加了对肠内容物水分的吸收，使粪便变得干硬 而难以排出。此外，肠黏膜上皮上的乳酸菌、双歧杆菌等能竞争性抑制肠道中的致病菌，也 能分泌丁酸为肠上皮提供 70%的能量，为肠道功能提供动力。因此，维护肠黏膜上皮的完 整性和保护肠黏膜上皮功能对治疗STC 有着不可忽视的作用。 具有抗氧化、抗炎作用的药物和天然产物能够有效地防止肠黏膜受到自由基、炎症介质、 细胞因子的破坏，保护肠黏膜的完整性，从而促进STC 肠道功能的恢复。由于对STC 的防 治需要长时间的干预，因此在选择治疗药物上更倾向于使用食用安全范围更广的天然产物。 因此，探求一种长期有效且无毒副作用的天然产物具有重要意义。 槲皮素（Quercetin ）是黄酮类物质的主要成分，来源广泛，具有抗氧化、抗炎及抗感染 抗肿瘤等多种生物活性作用。现代药理试验表明槲皮素对心血管疾病、糖尿病、肿瘤等慢性 疾病有积极的防治作用，同时，研究也证实槲皮素对人体无毒无害、无致畸性和致癌性，长 期食用安全性高。故槲皮素可作为保护肠黏膜，促进肠道功能的恢复，缓解慢性传输性便秘 的原料。 本研究拟考察槲皮素对慢性传输性便秘小鼠的通便作用，并研究槲皮素保护肠黏膜，缓 解 STC 的机制，以及对松针中的槲皮素进行提取分离，为食物辅助治疗便秘和通便功能食 品的研制提供理论依据。 方法 1 小鼠慢性传输性便秘模型的建立 1.1 使用复方地芬诺酯片混悬液，灌胃小鼠建立慢性传输性便秘模型 1.2 小鼠排便情况评价 观察记录每只小鼠首次排黑便时间、6h 内排黑便粒数及重量并观察黑便的性状。 1.3 制作小鼠结肠组织病理切片，观察小鼠结肠病理切片变化。 2 槲皮素通便功能的评价 2.1 观察槲皮素对各组小鼠的首次排黑便时间，6h 内排便粒数和重量，肠内容物的粒数和重 量的影响，来评价槲皮素的通便效果。 2.2 测定小鼠血清中丙二醛（MDA ）的含量。 2.3 制作小鼠结肠组织病理切片，观察各组小鼠结肠病理切片变化。 3 槲皮素对肠道菌群的影响 万方数据 3.1 使用平板计数法测定小鼠结肠内容物和粪便中肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌和乳酸菌的含 量。 3.2 测定小鼠血清中乳酸的含量。 3.3 测定小鼠结肠内容物的pH 值 3.4 测定小鼠结肠TNF- α、IL-6、EGF 的mRNA 的表达 4 松