FB1Ci-ELISA检测方法的建立及初步应用The establishment and preliminary application of FB1Ci-ELISA detection method.pdfVIP

万方数据 Anhui Agricultural University Master Dissertation Thesis Establishment of Competitive Indirect Enzyme-linked Immunosorbent Assay for FB1 and its Application Answerer ： LI Fu-hui Advisor ： WANG Xi-chun Cooperative Advisor: WU Jin-jie Academic Degree Applied for ： Master of Agriculture Major ： Clinical Veterinary Science Research Field ：Livestock and poultry poisoning disease and food safety Institute： College of Animal Science and Technology Answer Committee Chairman: June 2014 万方数据 万方数据 中文摘要 伏马菌素（fumonisins ）是一组主要由串珠镰刀杆菌在产生的真菌毒素，其广泛 存在于粮食与饲料中，尤其是玉米、小麦及其一些农副产品污染较为严重，对人畜的 健康造成较大的威胁。目前，已发现有15种伏马菌素，其中FB 、FB 和FB 是自然界 1 2 3 中产生的主要毒素，而FB 被认定是污染玉米及其制品的主要组分，也是伏马菌素毒 1 性产生的主要原因。 FB 具有神经毒性、细胞毒性、免疫毒性、肝肾毒性以及致癌性等，被国际癌症 1 研究中心（IARC ）划分为2B类致癌物。大量研究发现，FB 与人类食道癌的发生有 1 着密切的联系，但未有直接证据证明。当前，针对FB 的检测方法主要有高效液相色 1 谱法（HPLC ）、气相色谱法（GC ）、液相色谱-质谱联用法（LC-MS ）以及酶联免疫 吸附法（ELISA ）等。由于色谱法对仪器要求较高，费用昂贵，且需要专业人员进行 操作，限制了仪器的推广应用，而ELISA具有特异性高、灵敏度好，简单快速等优点 得到了较为广泛的应用，受到众多专家的青睐。本研究主要是在FB 完全抗原及其单 1 克隆抗体的基础上，建立一种Ci-ELISA方法，并进行了玉米样品的临床检测。 本试验首先采用了戊二醛一步法对半抗原FB 与载体蛋白OVA进行偶联，制备完 1 全抗原，分别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS)、紫外扫描法(UV)和质谱法(MS) 等对FB 与OVA的偶联效果进行鉴定，结果显示偶联成功。经质谱法检测得FB -OVA 1