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第二篇:生物化学分的析的常规方法
生物化学实验设计过程
生物化学分析方法
主要生物物质分析(含量和活性测定)
实验材料的选择与处理
目的物的提取与分离
生物物质的浓缩、干燥、保存及纯度鉴定;生物化学实验的化学过程
生物化学实验的物理过程
实验方法的组合;1、实验的化学过程;几个要求;2、实验的物理过程;(2)物理过程所需设备的选择;3、实验方法的组合;生物化学实验过程的设计;二、 生物化学分析方法; 1.重量法; 2.化学法; 3. 分光光度法; 4. 酶法; 5. 色谱法;三、 主要生物物质分析; 1. 水分测定(生化分析的基础); 含水量的表示方法; 2. 碳水化合物分析; 碳水化合物的定性定量分析方法; 可溶性糖定量测定的常用方法;(2)还原糖的测定;Somogyi-Nelson比色法(砷钼酸比色法);(3)可溶性总糖的经典测定方法 ;淀粉的测定;脂类;脂质的提取; 组分分离、
分析方法; 粗脂肪的测定; 4. 蛋白质分析;消化炉及消化过程; 可溶性蛋白质含量的测定方法; 5. 核酸分析(核酸含量测定);灰分测定:重量法; 矿质元素测定(定性定量分析);酶的提取及活性测定:;生物大分子活性物质的存在方式和存在特点
实验材料的选择和要求
材料的预处理
生物组织与细胞的破碎;1、 生物大分子活性物质的存在方式及存在特点;生物大分子分离纯化的一般步骤;2、 生物材料的选择和预处理;(2)材料采集、保存和预处理; 动物样品预处理:清洗→去结缔组织、脂肪组织等→绞碎、匀浆→脱脂→冷冻处理(液氮或超低温保存)。; 微生物样品预处理:主要是固液分离。最常采用的方法为离心和过滤。液体部分可在低温下短时间保存,固体则可制成冻干粉于0-4 ℃长期保存。;一般动物组织和细胞可用电动捣碎机或匀浆器破碎或用超声波处理破碎。
植物组织和细胞由于具有纤维素、半纤维素和果胶等物质组成的细胞壁,一般常用与石英砂和适当的提取液一起研磨的方法破碎或用纤维素酶处理也能达到目的。
细菌细胞的破碎比较困难,因为整个细菌细胞壁的骨架实际上是一借共价键连接而成的肽聚糖囊状大分子,非常坚韧。破碎的方法常有超声波震荡、与石英砂研磨、高压挤压或溶菌酶处理(以分解肽???糖)。;五、目的物的提取与分离;;;;六、生物物质的浓缩、干燥、保存及纯度测定;2. 生物物质的干燥;4. 生物物质的纯度鉴定
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