骨髓间充质细胞的研究进展.pdfVIP

沈阳医学院学报 JournalofShenyangMedicalCollege 第 15卷 第4期 2013年 l2月 骨髓问充质细胞的研究进展 谭方正 ，刘新 ，朴成哲 (1．沈阳医学院基础医学院医学检验专业 2010级，辽宁 沈阳 110034；2．基础医学院病原生物学教研室，3．沈阳医学院附属中心医院 骨科) [关键词]骨髓间充质细胞 ；分离；培养；鉴定 [中图分类号]Q813 [文献标识码]A [文章编号]1008—2344(2013)04—0245—03 doi：10．3969／j．issn．1008—2344．2013．04．021 骨髓间充质细胞 (bonemarrowstromalcells， 瓶中贴壁生长，而血细胞和造血干细胞细胞易悬 BMSCs)是指骨髓基质系统中含有的一类多能干 浮生长的特性，逐步将非贴壁细胞核其他杂质细 细胞，它不表达造血干细胞的相关标志，在不同 胞去除的一种简单易行的方法，但这种方法无法 的诱导条件下，具有向中胚层和神经外胚层组织 很好去除成纤维细胞，且获得的细胞纯度不够。 细胞分化的能力。BMSCs来源广泛，可以分化为 2．1．3 密度梯度离心法 根据BMSCs与其他细胞 更多种类的组织细胞，分离培养较为容易，植入 密度不同而采用 Ficoll或Pereol1分离液，通过对 反应较弱，易于被外源基因转染且稳定表达。本 骨髓液进行梯度离心，去除骨髓 中的血液成分， 文就BMSCs的研究进展作简要综述 。 获取界面的有核细胞进行培养。使用该方法分离 的细胞纯度较高，但此法常影响细胞的增殖活动 1 BMSCs的生物学特性 且操作较繁琐。 BMSCs具有干细胞 自我修复、自我更新、高 2．1．4 免疫磁珠分选法 根据磁珠既可结合蛋 白 度增殖和多向分化潜能的特性 ，不同诱导条件可 质又可被磁铁所吸附，经过一定处理将抗体或抗 使其向成骨细胞、脂肪细胞 、心肌细胞、神经细 原结合在磁珠上，使之成为抗体或与抗体结合后， 胞、上皮细胞转化，被认为是一种理想的组织工 形成抗原 一抗体磁珠免疫复合物在磁力作用下， 程种子细胞。BMSCs可以逃避免疫系统的识别 J。 发生力学移动，使复合物与其他物质分离，从而 Krampera等 研究 BMSCs可以抑制 T细胞增殖， 达到分离特异性抗原或抗体的目的，该方法的优 但多数关于 BMSCs免疫抑制效应的研究都是在体 点是避免了免疫毒素和补体裂解带来的非特异性 外进行的，其免疫逃逸和免疫抑制的确切机制 尚 杀伤作用，并可 以处理大量的细胞样 品。但抗体 不清楚。 价格昂贵，普及推广受到限制。 2．2 BMSCs的鉴定 (1)形态学鉴定 ：BMSCs 2 BMSCs的分离培养与鉴定 呈梭形，细胞扁平，胞体狭长，核呈椭圆形，贴 2．1 BMSCs的分离培养方法 壁生长，成漩涡状或辐射状排列。 (2)流式细胞 2．1．1 全骨髓法 利用 BMSCS的较强贴壁性对 仪检 测：CD29、CD44 阳性；CD34、CD45 阴 其进行分离，而细胞的生存、生长需要的某些因 性 j。(3)BMSCs具有体外诱导分化为已知细胞 子来 自于与其伴生的其他细胞，该法在很大程度 的能力，目前普遍鉴定 BMSCs常用的方法是：检 上模拟了体内BMSCS的生长环境，含有的若干生 测细胞分化后产生矿化或骨样化结节。 长因子及促黏附物质促进 了BMSCs的贴壁生长。