微生物检验教学课件（扬州大学）第一节 沙门氏菌检验.pptVIP

第一节 沙门氏菌检验 沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。在世界各国的各类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。 在英国, 以沙门氏菌占首位。 美国则为第2位,仅次于金色葡萄球菌。 日本则以副溶血弧菌和金色葡萄球菌为最多,沙门氏菌占第3位。 我国内陆地区也是以沙门氏菌为首位。 世界上最大的一起沙门氏菌食物中毒是1953年于瑞典由吃猪肉而引起的鼠伤寒沙门氏菌中毒,7717人中毒,90人死亡。 沙门氏菌属于肠杆菌科,至今已有2230种以上的血清型。 概 况 沙门氏菌引起人的伤寒、副伤寒、感染性腹泻、食物中毒和医院内感染，并引起动物的沙门氏菌病，是重要的肠道致病菌。 该菌属在医学、兽医和公共卫生上均十分重要： 沙门氏菌的分类 根据新近的沙门氏菌的分类方案，本属菌现可分为两个种： 肠道沙门氏菌（S.enterica） 邦戈尔沙门氏菌（S.bongori） 肠道沙门氏菌又分为6个亚种： 肠道亚种（enterica） 萨拉姆亚种（salamae） 亚利桑那亚种（arizonae） 双相亚利桑那沙门氏菌（diarizonae） 豪顿沙门氏菌（houtenae） 因迪卡沙门氏菌（indica） 抗原结构 菌体(O)抗原─分群 鞭毛(H)抗原─分型 毒力(Vi)抗原─微荚膜成分 1、O抗原 O抗原是细胞壁表面的耐热多糖抗原； 根据O抗原（群因子）将沙门氏菌分为A、B、C1-C4、D1-D3、E1-E4、F、G1-G2、H……Z和O51-O63以及O65-O67计51个O群，包括58种O抗原。 2、H抗原 H抗原是本属菌的蛋白质性鞭毛抗原，计有63种； 第一相（特异相）：小写英文字母，特异性高 第二相（非特异相）：阿拉伯数字，少数用英文字母，特异性低 同一O群的沙门氏菌又根据它们的H抗原的不同再细分成许多不同的血清型。 3、Vi抗原 Vi抗原是微荚膜成分； 相当于K抗原，与毒力（virulence）有关，故称为Vi抗原。 新分离的菌株多有Vi抗原，在普通培养基上多次传代后易丢失此抗原，这种变异称为“V-W变异”。 4、血清型 以O:H:Vi形式表示： 用已知的沙门氏菌O和H单因子血清作玻板凝集试验便可确定一个沙门氏菌分离物的血清型或抗原式，对可能有Vi抗原的菌株还须用Vi 抗血清鉴定之。 举例：1,4,[5],12:i:1,2 9,12,Vi:d:– 目前本菌属至少已有2500个血清型。对人和温血动物致病的血清型绝大多数分属于A?F群，在疾病中经常出现的不足50种。 常用检验用培养基 DHL琼脂成分 蛋白胨 20 g 牛肉膏 3 g 乳糖 10 g 蔗糖 10 g 去氧胆酸钠 1 g 硫代硫酸钠 2.3 g 柠檬酸钠 1 g 柠檬酸铁铵 1 g 中性红 0.03 g 琼脂 18?20 g 蒸馏水 1000 ml pH 7.3 制法： 将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400 ml 蒸馏水中，校正pH，再将琼脂于600 ml蒸馏水中煮沸溶解，两液合并，并加入0.5%的中性红水溶液6 ml，待冷至55 ℃，倾注平板。 SS琼脂(沙门氏-志贺氏琼脂) 基础培养基 牛肉膏 5g 蛋白胨 5g 三号胆盐 3.5g 琼脂 17g 蒸馏水 1000ml 121℃,15min高压灭菌 完全培养基 基础培养基 1000ml 乳糖 10g 柠檬酸钠 8.5g 硫代硫酸钠 8.5g 10%柠檬酸铁溶液 10ml 1%中性红溶液 2.5ml 0.1%煌绿溶液 0.33ml 加热溶化基础培养基,按比例加入上述除染料以外之各成分,充分混合均匀,矫正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板. 注1:制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于48h内使用 注2:煌绿溶液配好后应在10天以内使用 注3:可以购用SS琼脂的干燥培养基 亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC） 成分 蛋白胨 5 g 乳糖 4 g 亚硒酸氢钠 4 g 磷酸氢二钠 5.5 g 磷酸二氢钾 4.5 g L-胱氨酸 0.0