吉林食品安全地方标准.DOC

《乳粉中酪蛋白磷酸肽的高效液相色谱法》编制说明 (送审稿) 吉林2013年月 ，来源于天然优质蛋白质---牛乳酪蛋白，可以有效提高人体钙、铁、锌等二价矿物质的摄入量以及吸收利用率，还具有固齿、健齿、修复龈齿的作用。国外研究了CPP）的致敏反应，发现CPP的致敏性很小，表明它能够适用于对牛奶过敏的体质但也应注意到，影响CPP作用的因素非常复杂，在钙代谢过程中的作用还须GB 14880—2012）中，酪蛋白磷酸肽作为食品强化剂，用以弥补食品在正常加工、储存时造成的营养成分损失，以及补充和调整特殊膳食用食品中营养成分的含量。酪蛋白磷酸肽，在婴幼儿配方食品、婴幼儿辅助食品中使用量≤3.0g/kg。 当前国家标准、行业标准中没有用于检测婴幼儿配方食品、婴幼儿辅助食品中酪蛋白磷酸肽的方法。为了防止不按规定用量添加，造成安全隐患，急需建立有效的检测技术手段和方法，以此作为内乳产品风险监控的技术依据，维护消费者利益，特别是保障婴幼儿健康茁壮成长，使可能出现的食品安全事件在尚未产生严重危害前即被发现和处理，为食品安全提供技术保障，为有关部门的监督管理提供技术支撑。二、 起草单位：吉林农业大学 起草人基本情况： 姓名 性别 年龄 职称 工作分工 李泽鸿 女 47 副教授 项目负责人，文本编写、实验方案设计 刘继阳 男 27 在读研究生 验证方案设计及验证 于新海 男 27 在读研究生 验证方案设计及验证 刘 莹 女 25 在读研究生 资料收集、查新 张文慧 女 37 讲师 定性确认 刘树英 女 38 副教授 验证方案设计及验证 汪树理 男 39 实验师 实验方案设计 刘洪章 男 53 教授 资料收集、查新 赵福广 男 48 副教授 定性确认 史 飞 男 27 在读研究生 试样检测 张继元 女 25 在读研究生 数据统计 李昌昊 男 23 本科生 数据统计 雷 军 男 39 讲师 仪器实验条件设计 三、本标准起草人查阅了相关最新资料和文献，结合我国国情和国内实验室的特点，研制了一种新的检测方法相色谱建立了一个灵敏度高、选择性好、能为我国大多数的检测机构所使用的方法，为含量的检测提供了重要的依据，也对其他同类产品中含量的检测提供了参考。对确定的检测方法进行检出限、回收率、精密度等试验2．实验室间验证工作2012年-12月，我们邀请等单位进行了实验室间的验证工作。通过统计分析各个实验室的检测数据，验证了方法的准确度和精密度、最低检出限等。参加验证的实验室一致认为：该方法适用于测定乳中的含量，具有测定结果准确可靠、操作简单、快速等特点。、1．标准的名称 本标准利用液相色谱解决婴幼儿配方乳粉中酪蛋白磷酸肽测定的技术问题，所以将本标准的名称定为：《婴幼儿配方乳粉中酪蛋白磷酸肽的测定 高效液相色谱法》。 2．标准的范围 收集了婴幼儿配方乳粉样品进行试验验证，所以本标准适用范围为婴幼儿配方乳粉。 3．方法原理 乳粉在常温下，用去离子水溶解，以乙腈和0.1%醋酸溶液为流动相，在0 ( 30min内，乙腈由0 % ( 100 %梯度洗脱，经ZORBAX SB C18柱色谱柱分离，高效液相色谱紫外检测器280 nm 检测，保留时间定性，外标法测定试样中乳粉中酪蛋白磷酸肽的含量。 4．前处理条件 乳粉样品种类很多，可分为全脂乳粉、脱脂乳粉、全脂甜乳粉等等，其所含的成分复杂，存在有大量的蛋白质，分别用常温去离脂肪、乳糖、乳酸、氨基酸等等。为了检测乳粉中酪蛋白磷酸肽的总含量，我们用水、乙腈、0.1%乙酸分别进行溶解，通过对比乳粉溶解性得出常温去离子水溶解效果最好，乳粉产品溶解效果明显，同时也免除使用酸、碱溶液对实验的干扰，因此根据相关参考文献和技术文献的实验条件，确定本方法的样品溶剂为去离子水。 5．仪器分析条件 5.1洗脱液的选择 样品为粉剂，易溶于水，而在有机溶剂中可溶性较差，处于微溶状态，我们在方法研究过程中，虑相色谱，，易于推广，实用性强。0(20 min、0(30 min、0(40 min、0(50 min等多个时间段，进行乙腈由0 %(100 %的匀速梯度洗脱，既保证了样品与目标物的完全分离，且峰形良好，又保证了有效的分析时间。因此，最终确定仪器的工作条件为： a）×250 mm× 5 (m）。 b）c) 流动相：乙腈和0.1 %醋酸溶液，在0(30 min内，乙腈由0 %(100 %梯度洗脱。 d）e）f）进样量：0 (L。 图1 标准品6．液相色谱线性范围 将10(g/mL～200(g/mL酪蛋白磷酸肽系列标准溶液用安捷伦1100液相色谱仪检测得出的一系列峰面积与浓度的对应点连点成线，得到拟合标准曲线y=0.2107x + 0.9217,r =0.9991,可见在10(g/mL～200(g/mL浓度范围内线性很好,如