橘子中Vc含量的测定与分析.pptVIP

橘子中Vc含量的测定与分析 制 作 者 卢娉婷 同组成员 谢晓雯 初步学会水果中Vc的测定； 了解Vc的功能，在日常生活中能合理膳食。 【实验目的】 Vc又名抗坏血酸，是人体维持生命不可缺少的营养成分之一。其生理功能是促进人体胶原蛋白的合成、参与体液中的氧化还原反应及解毒等。在蔬菜和水果中，含人体所需的多种营养成分，其中，Vc作用突出。 【实验原理】 Vc的测定方法主要有紫外分光光度法、红外光谱法、2,6-二氯靛酚滴定法、高效液相色谱法、原子吸收法、碘量法等。其中原子吸收法、高效液相色谱法的仪器相对昂贵；碘量法操作步骤繁琐，且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响；紫外分光光度法是根据Vc对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243.4nm[1]处测定样品液与碱处理样品液两者的吸光度之差，通过标准曲线，即可计算样品中Vc的含量。 [1]从参考文献中获得 【实验原理】 材料：新鲜的橘子 试剂：抗坏血酸、HCl（1%/10%）、NaOH（1mol · L-1）、蒸馏水 仪器：紫外可见分光光度计、电子天平 （备注：紫外可见分光光度计的波长使用范围一般为190nm-1100nm，可见光分光光度计的波长使用范围一般为360nm-780nm。） 【仪器与试剂】 ·标准溶液的配制 准确称取0.050g抗坏血酸，加10mL10% HCl溶液，用蒸馏水定容至500mL，混匀，即得100μg · mL-1 Vc标准溶液。 ·标准曲线的绘制 分别准确移取100μg·mL-1 Vc标准溶液0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL、3.5mL、4.0mL、4.5mL、5.0mL于50mL容量瓶中，定容至刻度。以蒸馏水为参照，在243.4nm处测定吸光度，以Vc浓度为横坐标、吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 【实验步骤】 【实验步骤】 管号 Vc标准溶液(mL) Vc含量(μg) 吸光度 0 0 0 1 0.5 50 2 1.0 100 3 1.5 150 4 2.0 200 5 2.5 250 6 3.0 300 7 3.5 350 8 4.0 400 9 4.5 450 10 5.0 500 ·样品的处理 将橘子取肉，称取10.00g于研钵中，加入1% HCl 10mL，匀浆，转移到50mL容量瓶中，稀释至刻度，混匀，移至离心管中离心10min，取上清液即为待测液。 取1.0mL待测液，放入盛有2mL 10% HCl的50mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白，在243.4nm处测定吸光度。 再取1.0mL待测液、10mL蒸馏水和4mL 1mol·L-1NaOH溶液放入50mL容量瓶中，摇匀；静置20min后加入4mL 10% HCl，混匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白，在243.4nm处测定其吸光度。 【实验步骤】 ·吸光度的确定 待测提取液与碱处理提取液的吸光度之差即为样品吸光度。 ·Vc含量的计算 测得样品的吸光度后，依据标准曲线方程，即可计算出果蔬中Vc的含量[mg·(100g-1)]。 Vc含量=c*V总*V待测总*100/(V1*W总*1000) [备注：c为依标准曲线方程计算得到的Vc浓度(μg·mL-1)；V1为测吸光度时吸取待测液的体积(mL)；V总为吸取样品定容总体积(mL)；V待测总为待测液总体积(mL)；W总为橘子质量(g)；100为100g橘子。] 【实验步骤】 配制标准溶液 绘制标准曲线 提取待测液 待测液‘ 碱处理 测定吸光度 测定吸光度 A243.4 A243.4’ 减去 样品的吸光度 【实验流程】 维生素C还原性很强，在空气中易被氧化，在酸性介质中氧化作用减慢，水溶液在pH=5~6之间稳定。 【注意事项】