苦芩提取液对细小病毒弱毒疫苗免疫犬血清CPV抗体水平的影响.docxVIP

中国畜牧兽医学会中兽医学会第八次全国代表大会暨2014年学术年会论文集437[15]张艳，范俊安．药材牡丹皮研究概况Ⅳ丹皮药理作用研究概况[J]．重庆中草药研究，2009，l：26—37．[16]刘睿，段金廒，李友宾，等．水牛角主要药效学评价及解热活性物质基础研究[J]．南京中医 药大学学报，2007，23(5)：297—301．[17]金若敏，陈长勋，范广平，等．犀角与水牛角药理作用的研究[J]．中成药，1997，19(7)：33-34． [18]曾艳，贾正平，张汝学．地黄化学成分及药理研究进展[J]．巾成药，2006，28(4)：609—611． [19]刘福君，赵修南，汤建芳，等．地黄寡糖对SAMP8小鼠造血祖细胞增殖的作用[J]．中国药理学与毒理学杂志，1998，12(2)：127-130． [20]何昱，洪筱坤，王智华．钩藤及其有效成分的药理研究进展[J]．上海中医药杂志，2003，37(11)：57-60．苦芩提取液对细小病毒弱毒疫苗免疫犬血清CPV抗体水平的影响邱洪，朱兆荣，刘娟，周太芳，罗中平(西南大学荣昌校区兽医科学研究中心中药创新研究室，重庆，荣昌，402460)摘要：试验旨在研究中药苦芩提取液对疫苗免疫效果的影响。方法：60只健康犬随机分为4组，分别为空 白对照组(I)，疫苗组(II)，苦芩组(ⅡI)，疫苗+苦芩组(IV)。第1组注射生理盐水，第1I组肌肉注射犬细 小疫苗，第1II组灌胃1 g／kg的苦芩进行预防，第Ⅳ组接种疫苗后灌胃1 g／kg的苦芩，连续1周，每日2次。 免疫后第1、7、14、21采血，分离血清并采用血球凝集抑制试验测定其CPV抗体滴度。结果：免疫后第1、7天， Ⅳ组犬血清CPV抗体水平并没受到苦芩提取液的影响。而免疫后第14、21天，灌服苦芩提取液的犬血清CPV HI 抗体水平明显高于ⅡI组，差异显著(PO．05)。结论：苦芩提取液对CPV免疫犬血清CPV抗体水平有增强作用。关键词：苦芩提取液；犬细小病毒：抗体犬细小病毒病是由犬细小病毒感染犬只而引起的一种高度接触性传染病，其发病率高、死亡率 高，对我国养犬业带来了严重经济损失 。目前对畜禽病毒病的防治方法主要有疫苗，抗病毒的化 合合成药物以及外源性细胞因子等。但病毒种属多，血清型多，为疫苗防治时带来困难：抗病毒化 药已全面禁用；抗病毒干扰素费用昂贵控‘41。许多中药能辅助机体抵抗病毒的侵袭，且中药具有价 格低廉、不良反应少、药源广泛等优点，用中药对病毒性疾病的防治等方面具有很好的应用前景崎。81。 中药用于改善畜禽生产性能和提高抗病免疫力方面的研究较多，而有关中药对犬细小病抗体水平尚 未见报道。我们根据中兽医理论和临床辨证的原则，选取苦参、黄芩、黄芪和金银花等多味中药组 成苦芩复方来治疗犬细小病毒病。前期研究证明，中药苦芩通过保护细小病毒病犬的胃肠黏膜，增 强机体免疫力以及体外抗病毒等方面，进而对犬细小病毒病起到一定预防和治疗作用旧1¨。本试验 拟观察苦芩提取液对犬细小病毒活疫苗在犬血清CPV抗体的影响，探索苦芩提取液作为一种犬细小438中国畜牧兽医学会中兽医学分会第八次全国代表大会暨2014年学术年会论文集病毒疫苗免疫增强剂的可能性。 l材料与方法 1．1试验材料1．1．1毒株、细胞与实验动物 毒株：犬细小病毒，四川农业大学彭广能馈赠，由西南大学荣昌校区P2生物安全实验室保存，试验前检测该病毒TCID50为10-5．76／0．1ⅡlL。细胞：猫肾细胞(F81)，中国科学院典型培养物保 藏中心昆明细胞库，编号：KCB2006104YJ。中华田园犬，80只，1l—14周龄，雌雄皆可，西南大学荣昌校区动物中心提供，注射狂犬病疫 苗，左旋咪唑驱虫，隔离观察1周，确认健康无病后用于试验。1．1．2试药与主要仪器 苦芩提取液(Kuqin，简称KQ，下同)由西南大学荣昌校区中药教研室研制，主要由黄芩、苦参、金银花、黄芪等中药提取制备而成，使用前，依据试验需要进行稀释即可使用。 犬细小病毒活疫苗为美国硕腾公司生产的产品；RPMI 1640，Gibco公司产品。隔水式恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司)；姗一I型微量振荡器(上海亚荣生化仪器厂)。1．2试验方法1．2．1动物分组与处理 将80只犬随机分为4组，空白对照组(I)，疫苗组(II)，苦芩组(IlI)，疫苗+苦芩组(IV)。第1组生理盐水灌胃，第Ⅱ组肌肉注射犬细小疫苗。第Ⅲ组KO(1 g／kg)灌胃，第Ⅳ组肌肉注 射犬细小疫茁免疫后，KQ(1 g／kg)灌胃，连续1周灌服，每日给药2次。各组犬在试验处理 后第l、7、14、21天，每只犬前肢桡静脉采血3 mL并分离血清，一20。C保存备用。1．2．2CPV血凝试验 按照Carmichael和Senda等报道的方法进行，亦按其标准判定