托吡酯在血清和脑脊液中药代动力学的比较性的分析研究.pdfVIP

一 中文摘要 第一部分 托吡酯在血清及脑脊液中药物浓度测定的方法学研究 目的 建立测定血清和脑脊液（cerebrospinal liquid，CSF）中 托吡酯(topiramate，TPM)药物浓度新的检测方法即气相色谱-质谱法 (GC-MS)，为进行TPM的药代动力学研究和临床药物浓度监测奠定基 础。方法 采用乙酸乙酯提取样品，盐酸阿米替林作为内标，氦气为 1.0ml/min 91.5kPa 150 载体，流速为 ；柱前压为 。升温程序：柱温 ℃恒 -1 2min 20 min 280 温 ，以 ℃· 的速率升温至 ℃。以电子轰击离子源（EI）, 324 202 选择性离子监测（SIM）模式分别选择M/Z为 和 的碎片离子对TPM 和阿米替林进行检测。结果 在血清及CSF中无干扰TPM测定的内源性 物质，在血清中TPM标准曲线范围为0.180～35.933 μg ·ml-1,线性关系 良好（r=0.9994），实测最低定量浓度为0.180 μg ·ml-1 ，血清样品检 测的日内RSD≤8.53%，日间RSD ≤14.19%，萃取回收率平均值为 64.09% ，相对萃取回收率为80.26% ；CSF 中TPM标准曲线范围为 0.0359～35.933 μg ·ml-1,线性关系良好（r=0.9996），最低定量限为 0.0359 μg ·ml-1 ，CSF 样品检测的日内RSD≤7.70%，日间RSD≤10.57%， 萃取回收率平均值为79.8%，相对萃取回收率为86.15%。结论 本实验 成功地建立了TPM在血清及CSF中药物浓度检测的GC-MS法，各项指标 均符合生物样品分析测定要求，专属性强，灵敏度高，重复性好。该 方法适用于临床药物动力学研究和常规的TPM临床药物浓度监测。 关键词 托吡酯 气相色谱－质谱法 血清药物浓度 脑脊液药物浓度 4 第二部分 不同剂量TPM 顿服在Beagle 犬血清和CSF 中药-动学的比 较性研究 目的 （1）观察不同剂量 TPM 在 Beagle 犬血清中药代动力学 (pharmacokinetics，PK)特征；（2 ）观察不同剂量TPM 在Beagle 犬 脑内药代动力学特征；（3 ）比较不同剂量TPM 同期在血和脑内药代动 力学变化的差异及其相关性，以探索血脑屏障对TPM 在脑内代谢的影 响；（4）探索不同剂量TPM 在血清和脑内药代动力学的不同变化。方 法 （1）将6 月～12 月龄、体重9.6 kg～14.2kg Beagle 犬12 只随 机分为3 组，每组4 只，雌雄各半，分别给予TPM10mg ·kg-1 、20mg · -1 -1 kg 、40mg ·kg 灌胃顿服，于用药前0 点、用药后0.25、0.5、0.75、 1、1.5、2、4、6、10、14、20、26、36h 同时抽取血清及CSF 标本； （2）用GC-MS 检测所采集的血清和CSF 标本中TPM 药物浓度；（3） 用药物代谢动力学软件DAS2.0 程序处理药-时数据，拟合房室模型， 计算药物动力学参数，峰浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）取实测值， 运用SPSS 软件包中Wilcoxon 符号秩和检验、成组设计多样本比较的 秩和检验和直线相关与回归检验，对各组TPM 在血清和CSF 中的主要 药代动力学参数进行统计学分析，以P＜0.05 有统计学意义，P＜0.01 有显著性差异。结果 （1）经过时-药浓度和药-时曲线以及据此所计 算出的药代动力学参数比较，低、中、高剂量顿服给药后在血清中除 Cmax 随剂量增加而呈正相关增高外， 其余主要药-动学参数无统计 学差异，Tmax 均为 1.5