盐酸关附甲素对心肌钠通道及辅助亚基调控机制研究Study on the regulation mechanism of sodium channel and auxiliary subunit of myocardial sodium chloride.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………．1 英文摘要…………………………………………．3 —1上^—．L 日Ⅱ舌……………………………………………．．5 第一部分…………………．．．……………………．7 材料与方法………………………………………．．7 实验过程及方法……………．………………………8 结果……………………………………………．．13 讨论……………………………………………．．17 第二部分…………………………………………．22 材料与方法．…………………………．……………22 实验过程及方法…．……………………………．．．…23 统计分析…………………………………………．26 结果……………………………………………．．26 结论及讨论………………………………………．．29 附表．．．…．………．．…．．．…．．．…．……．．………．．32 第三部分…………………………………………．35 材料与方法……………．…………………………．35 实验过程及方法……………………………………．36 统计方法…………………………………………．41 结果……………………………………………．．41 结论与讨论……………………………………．．…45 ．1． 附图…………………．…………………………．50 参考文献…………．．…………．…………………．62 综述…．．………．．．…………．…………………．．67 致谢………………．……．………………………78 盐酸关附甲素对心肌钠通道及辅助亚基调控机制研究 摘要 第一部分乳鼠心肌细胞原代培养 目的：为第二部分及第三部分药物干预实验提供合格心肌细胞。方法： 以出生24zJ,时以内乳鼠作为实验材料，酶分离法于无菌条件下消化分离出 单个心肌细胞，使用差速贴壁法分离纯化心肌细胞。用含10％胎牛血清的 每24小时换二分之一体积培养液，当细胞搏动频率大于100次／分后，可进 行第二部分实验。结果：成功培养出可自主搏动的心肌细胞25次，且细胞 搏动频率均达100次／分以上。结论·i乳鼠出生时间越短，其心肌细胞活性 越强。严格无菌操作是细胞培养的基础；分离消化过程中减少组织细胞损 伤是细胞存活的前提；培养过程中保持细胞所处环境稳定，是提高原代培 养心肌细胞质量的保障。 关键词：细胞培养：原代细胞分离；乳鼠心肌细胞原代培养 第二部分：盐酸关附甲素及胺碘酮对乳鼠离体心肌细胞干预 base 目的：探讨盐酸关附甲素(Guanfu 孵育离体培养的心肌细胞后，其自主搏动节律的变化情况。方法：以第一 部分实验所得的心肌细胞，为本部分实验材料。使用不同浓度的GFA及 肌细胞搏动频率。观察不同干预条件，心肌自主搏动频率变化。每个时间 点观察完毕后，收集细胞，于．80℃保存，作为第三部分实验材料。结果： ．1． 间及药物浓度呈正相关，Amio抑制作用与孵育时间相关性更强。当孵育时 间达到一定长度后，两种药物对心肌细胞自主搏动频率的抑制差异不再具 有统计学差异。结论：GFA及Amio均可抑制离体心肌细胞自主搏动，且 两者抑制效果不具有统计学差异。 关键词：盐酸关附甲素：胺碘酮：可达龙：心肌细胞搏动频率 第三部分：盐酸关附甲素及胺碘酮对心肌细胞钠通道及其辅助亚基 表达的影响 目的：检测两种药物对心肌细胞钠通道及其辅助亚基表达的影响。方法： 时间依赖性。 SCN4B channeland mechanismofGFAoncardiacsodium Regulation UnItS auxiliary．subunitsSU Abstract PartI cultureofrats