低场核磁共振技术快速检测小球藻油脂含量及其在高通量-微生物学报.pdfVIP

生 物 工 程 学 报 刘婷婷 等/低场核磁共振技术快速检测小球藻油脂含量及其在高通量选育中的应用 385 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn March 25, 2016, 32(3): 385−396 DOI: 10.13345/j.cjb.150489 ©2016 Chin J Biotech, All rights reserved 生物技术与方法 1 1 3 1 1,2 1,2 1,2 刘婷婷 ，王涛 ，杨翼 ，王泽建 ，庄英萍 ，储炬 ，郭美锦 1 200237 2 200237 3 200237 , , , . . , 2016, 32(3): 385–396. Liu TT, Wang T, Yang Y, et al. Low field nuclear magnetic resonance for rapid quantitation of microalgae lipid and its application in high throughput screening. Chin J Biotech, 2016, 32(3): 385–396. 摘 要: 为了建立一个高效的高产油微藻诱变育种流程，微藻中油脂含量快速和准确的测定在其中具有重要 作用。在本研究中，首先利用低场核磁共振技术，建立了直接检测干藻粉和培养液中小球藻油脂含量的方法， 其信号强度与细胞中油脂含量存在特异的线性关系，干藻粉和藻液中油脂含量与信号值拟合的R2 均高于0.99 ， 说明该方法用于小球藻油脂含量的检测是准确和可行的。同时该方法与传统油脂测量方法相比，具有快速、简 便和准确等优点。但其通量不及尼罗红染色法，因此，我们开发了将尼罗红染色法用于初筛，低场核磁共振技 术用于复筛的新型高通量藻种复合筛选方法，并将此筛选方法应用于一种异养高产油原壳小球藻的诱变育种过 程中。首先从3 098 株诱变藻种中初筛得到 108 株具有较高油脂含量的藻株，然后利用低场核磁共振技术复筛 得到 9 株高产油性能的藻株，其中一株甘油三酯含量超过20% ，比原始藻株提高1 倍，培养 168 h 后培养液油 脂浓度达到5 g/L ，证明此诱变育种流程不仅提高了筛选的效率还可靠且可行。 : 低场核磁共振，诱变育种流程，微藻，油脂检测 Received: November 18, 2015; Accepted: January 6, 2016 Supported by: National Basic Research and Development Program of China (973 Program) (No. 2011CB200900). Corresponding author: Meijin Guo. Tel/Fax: +86-21 E-mail: guo_mj@ (973 ) (No. 2011CB200900) 2016-01-26 /kcms/detail/11.1998.Q0932.001.html 386 ISSN 1000-3061 CN 11-1998/Q Chin J Biotech March 25, 2016 Vol.32 No.3 Low field nuclear magnetic resonance for rapid quantitation of microalgae lipid and its application in high throughput screening 1 1 3