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炮制前后山茱萸煎液、溶出层面比较探究 　　[摘要] 从煎液、溶出层面对炮制前后山茱萸中活性成分进行比较研究。采用HPLC，中药煎出法，溶出度法对炮制前后山茱萸的活性成分马钱苷、莫诺苷的煎出率与溶出度特征进行比较研究。结果表明，炮制前后活性成分马钱苷、莫诺苷含量变化不明显；与生品相比，制品（煎液）中马钱苷的含量增高明显，而莫诺苷变化不明显；与生品相比，溶出度层面，在肠液中，制品（提取物）马钱苷的溶出度差别不明显，而莫诺苷溶出度增大、差别明显；在胃液中，制品马钱苷、莫诺苷的溶出度均减少、差别明显，但综合考虑临床上服用的煎药剂量，添加煎出率指标后，煎出溶出积=煎出率×溶出度，则在肠液与胃液中，制品的煎出溶出积指标均增大，差别非常明显，提示制品在临床应用方面优于生品。该文提出从煎液、溶出层面比较炮制前后活性成分变化和煎出溶出积指标，用于山茱萸炮制后的质量评价。 [关键词] 山茱萸；炮制；煎出溶出积；煎出率；溶出度；马钱苷；莫诺苷 [收稿日期] 2013-04-02 [基金项目] 国家自然科学基金项目；浙江省中医药科技计划项目（2009CB008） [通信作者] 丛晓东，硕士生导师，研究方向为中药活性成分与炮制，E-mail：congxiaodong199@ [作者简介] 周函钰，硕士研究生，TelE-mail：283222761@ 山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc为山茱萸科山茱萸属植物[1]，药用部位为除去果核后的干燥成熟果肉，主要成分为环烯醚萜类、有机酸类、鞣质类等[2]。2010年版《中国药典》收载为酒蒸，称“酒萸肉”。“酒蒸”较“清蒸”炮制方法相对温和，文献报道[3]表明环烯醚萜苷有多种重要的生物活性，如对糖尿病肾病变及糖尿病血管并发症均有良好的保护作用。山茱萸炮制后在药性和临床疗效上发生了很大的变化，尤以补益肝肾作用增强[4]。前期课题组对炮制前后山茱萸进行了一些比较研究[5-6]，其中，山茱萸炮制前后莫诺苷、马钱苷和山茱萸裂苷含量降低，5-HMF含量变化极其显著，没食子酸含量增高显著[7]，与文献报道结果一致[8-9]；血清药化研究发现，莫诺苷有5个代谢产物，马前苷有7个代谢产物，獐牙菜苷有5个代谢产物[10]，提示环烯醚萜苷为入血成分。本文拟从山茱萸炮制前后煎出率、溶出度等方面进行比较，观察炮制前后山茱萸活性成分马前苷、莫诺苷含量的变化，提出“煎出溶出积”概念，为深入评价山茱萸炮制后的用药质量提供依据。 1 材料 梅特勒XS-105电子分析天平（METTLER，TOLEDO）；梅特勒AL-204电子天平（METTLER，TOLEDO）；RV10旋转蒸发仪（IKA，GERMAN）；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；DLSB-5120低温冷却液循环泵（郑州长城科工贸有限公司）；DZF-6050真空干燥箱（上海一恒有限公司）；DHG-9240A电热鼓风干燥箱（上海一恒有限公司）；YB-IA真空恒温干燥箱（天津光学仪器厂）；HH-4数显恒温水浴锅（上海梅悉仪器有限公司）；TGL-16B离心机（上海安亭科技仪器厂）；RC806溶出试验仪（天津天大天发）；98-I-B电子控温电热套（天津市泰斯特仪器有限公司）；岛津LC-20AT高效液相色谱仪；SPD-20A紫外检测器；LC solution色谱工作站。 山茱萸生品、酒制品（河南省宛西制药股份有限公司，批号1000041，090618，080901）；马钱苷（批号111640-200604）购于中国食品药品检定研究院；莫诺苷（批号25406-64-8，HPLC归一化测定纯度≥98%）购于鼎瑞化工（上海）有限公司；乙腈（色谱纯，江苏汉邦科技有限公司），水为纯净水，其余试剂为分析纯。 2 方法与结果 2.1 山茱萸炮制前后成分含量比较 取山茱萸生品、制品粉末（过60目筛）约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10 mL，超声处理（功率100 W，频率40 kHz） 30 min，放冷，过滤，往滤渣分次加入甲醇适量，超声处理30 min，过滤，合并滤液到25 mL量瓶中，定容至刻度，精密吸取溶液0.5 mL于50 mL量瓶中，定容至刻度，即为供试品，按照药典方法进行测定[11]，结果见图1，2，表1。 1.莫诺苷；2.马钱苷。 图1 莫诺苷、马钱苷对照品的HPLC图 Fig.1 HPLC chromatogram of loganin and morroniside 1.生品；2.制品（图3，5同）。 图2 山茱萸醇提液的HPLC图 Fig.2 HPLC chromatogram