细胞图案化研究进展.docxVIP

V01．29高等学校化学学报 No．122008年12月CH|MICAL JOURNAL 0F(：HINFSE UNIV王cRSITIES2618～2626[综合评述]细胞图案化研究进展白海静，徐静娟，陈洪渊(南京大学化学化工学院，生命分析化学教育郎重点实验窒，南京210093)摘要细胞图案化是一种研究和控制细胞行为的有效实验方法，广泛用于细胞生物学、组织。I：程学、药物筛 选和创伤治≯，等各个研究领域．介绍了各种细胞恪j案化的制备方法，并对细胞网案化中涉及的特征物质以 及有关动态基底作了简要坪述．关键词细胞；图案化；动念皋底中图分类号0657 文献标识码A 文章编号025lm790(2008)12-2618J。9早在1911年，“接触引导”现象的彬f究先驱Harrison 通过实验证实细胞町沿蜘蛛丝排列生长，这 一结果给研究者如下启发：经适Ⅱ{设计加上的表面日r对细胞响应，包括细胞的生长、发育、增殖、分化 及迁移等一系列事件加以定位和控制．上I-I上纪后半叶，与细胞尺寸相匹配的微加上技术得以迅猛发 展，推动了蛋[J质和细胞图案化研究领域的问世．1967年，carter一。利用镍镂窄模板将有利于细胞黏 附的钯金属遮蔽蒸发至不利于细胞黏附的醋酸纤维素上，得到图案化，上长的细胞；1978年，MacAlear 和wehrung等。3。将半导体T、Ip技术用于蛋白质分f存生物微电r电路中的集成．利用微加工技术红基底上塑造微尺度的与细胞籼关的物理化学参量，如形貌、硬度、粗糙度、温 度、胞外摹质蛋白及绌胞生长因子等，制得细胞町寻址的图案化基底，进I而诱使细胞通过自身响应机 制选择忭地黏附于特定区域按没计形成图案，即细胞图案化．如今，细胞图案化已发展成为一种J’．泛 用于研究和控制细胞行为的实验工具，渗透至细胞生物学的基础研究领域以及组织工程。拳、细胞传 感、药物筛选和创伤治疗等各个应用领域，它的发展体现J，其高度交叉的特性，囊括了微加工技术、 材料学、生物。学、化学、物理。学以及更多的’Z科．细胞在体内处于一种高度信息化的微环境，其问充斥着各种各样的物理化学信号，细胞对各种信 号的刺激做出响应，帮助其所属组织实现功能化．细胞图案化作为一种带有模拟体系性质的实验方 法，一方面具有简化研究体系、使外来信号对细胞的影响变得清晰的能力，这对于细胞生物学的基础 研究大有裨益；另一方面，可逼真地复制l二述体内复杂微环境以迎合组织工程‘毕的需求，细胞图案化 共培养及细胞图案化三维培养等研究课题的出现正体现r这一发展趋叭前期不少综述4叫孔从不『司视角介绍了微加丁技术在细胞图案化。{J的应用，本文着重对目前发展的细胞图案化方法、细胞图案化研究涉及的特征物质以及一些动态基底加以总结．1常规细胞图案化方法各种物理化学信号在细胞培养基底上的微图案化是细胞图案化的前提，细胞在基底图案化之后， 通过受配体作用和免疫反应等各种途径选择性地黏附在特定区域．常规图案化过程叮分为限域和表面 修饰过程，以下对其方法进行简介．1．1限域方法1．I．1光刻技术光刻技术来源f半导体工业，最初用于金属在微电子电路L的图案化．在细胞培收稿日期：2008一10．21． 基金项日：国家“九七三”计划(批准弓|：2007cB936404，2006cB933201)和国家自然科学基金(批准号20890020)资助联系人简介：陈洪渊，男，教授，博上生导师，中国科学院院士，主要从事电分析化学研究．|c—mil：hychen@nju．edu．cn万方数据白海静等：细胞图案化研究进展2619养基底上旋涂感光胶，覆以掩模，继而曝光成型，是光刻技术的常规操作步骤(图1)．如Toner等¨6] 便直接利用光辐射后形成的感光胶结构作为蛋白质沉积模板，完成了原代鼠Jj}：细胞和3r13纤维原细胞 的共培养；又于硅烷化的玻璃基底上旋涂PEG感光胶，光刻制备以PEG为井壁、玻璃为底的微网案， Hj于细胞图案化培养。17。．昆而易见，光刻技术带米的是“两色打印效果”，即得到了被赋予不|-J性质的 感光胶覆盖Ⅸ和非覆盖区．近期，Bhatia等‘18。灵活地应用多步光刎技术，结合湿法蚀刻和等离子体蚀 刻，在细胞培养基底卜构建了3种表面化学成分区域，实现了两种细胞的图案化共培养，将光刻技术 的“两色”打印效果扩充至“三色”，硅现了光刻技术在人面积基底上制作多样图案的优势．Fig·l Schematic diagram of lithography(A)A cle卸subslrale coated by a layer of photoresi8t；(B)exposure u叫er appm—ate ligll¨hmu曲a m鼬k； (c)pattem of photoresisl aner