干酪乳杆菌LC-15的增菌培养基设计及生长动力学研究 Optimization of Enrichment Medium and Determination of Fermentation Kinetic Parameter for Lactobacillus casei LC-15.pdfVIP

干酪乳杆菌LC一15的增菌培养基设计及 生长动力学研究’ 陈 卫，陆 英，田丰伟，赵建新，张 灏 (江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡，214122) 摘 要 对1株具有降胆固醇作用的干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)LC-15的增殖培养基进行了筛选和优化， 同时对其在分批培养时的生长动力学进行了研究。所得增菌培养基配方为0．1mol／L pH6．8的Na。HPq一柠 檬酸配制经蛋白酶预水解的10％脱脂乳冻干粉，再添加0．5％的葡萄糖，1．5％的胰蛋白胨，0．3％酵母浸膏，在 此培养基中的最大菌数可达8．8×109cfu／mL，分别比MRS及脱脂复原乳中提高了1．35倍和0．75倍。得到的 干酪乳杆菌在优化培养基中分批培养的生长动力学模型为：N(t)=3．4088／(1+e3。””1’325“)。 关键词 益生菌，干酪乳杆菌，生长动力学，发酵剂 益生菌发酵剂对于益生菌发酵乳制品的开发与 干酪乳杆菌株(Lactobacilluscasei)LC一15，江 应用有很重要的研究意义，而发酵乳品质的优劣在很 南大学食品科学与技术国家重点实验室从西藏灵菇 大程度上取决于发酵剂的质量[1]。要获得优良的发 中筛选得到。 酵剂，必须对发酵剂在制备时的发酵条件、制备工艺 脱脂乳粉购自上海光明乳业有限公司；葡萄糖、 等进行优化[2]。高密度、高活性发酵剂制备的重要目 蛋白胨、牛肉浸膏等试剂购自中国医药集团上海化学 标是提高体积产率。对乳酸菌来讲，实现高密度培养 试剂公司；其余试剂为国产分析纯。 可以提高生产率，同时也能相应缩小发酵罐的容积和 实验所用培养基为MRS[6]、10％脱脂乳培养基 降低生物量的分离费用。通常牛乳是乳酸菌较为适 (RSM)、6％乳清培养基、蛋白酶水解10％脱脂乳培 宜的培养基，但用于乳酸菌的高密度培养却不适 养基和蛋白酶水解6％乳清培养基。 宜[3]，因此研究开发一种适宜于干酪乳杆菌LC-15培养基RSM的配置方法：将10g脱脂乳粉溶于 高密度培养的培养基具有重要意义。发酵过程中 90g去离子水中，于115℃高压灭菌10min，灭菌后 pH的降低会造成菌体酸损伤，活菌数下降，除了在 置于37℃下培养3d，确认无菌后使用。 发酵过程中流加碱从外部控制pH外[4]，还可通过在 蛋白酶水解10％脱脂乳培养基配置方法：用中 配置培养基时利用缓冲盐溶液控制pH(即pH内控)性蛋白酶按E／S=1：1 的方法来提高乳酸菌得率，目前国外已有较多利用缓 rain，用0．5mol／L NaOH维持pH8．0，水解结束后 冲盐溶液来降低代谢产物对细胞生长抑制的报道[5]， 立即加热煮沸5 ℃10 但国内这方面的研究仍然很少。文中对从西藏灵菇 min灭菌备用。 中筛选得到的1株具有调节血脂功能的干酪乳杆菌 蛋白酶水解6％乳清培养基配置方法：用中性蛋 LC_15的增殖培养基进行筛选、优化，设计营养均衡白酶按E／S=1：1000在37℃水解6％乳清粉30 pH内控型培养基，以提高乳酸菌的比生长速率和活 min，用0．5mol／LNaOH维持pH8．0，水解结束后 细胞密度，同时对干酪乳杆菌LC-15在分批培养时立即加热煮沸5 ℃10 钓生长动力学进行研究。 min灭菌备用。 1．2主要仪器 1 材料和方法 高速冷冻离心机：德