固相萃取-HPLC测定肉制品中苯甲酸、山梨酸.pdfVIP

第 38卷 第 3期 化 工 技 术 与 开 发 VoI．38 No．3 2009年 3月 Technology DevelopmentofChemicalIndustry Mar．2009 固相萃取一HPLC测定肉制品中的苯甲酸、山梨酸 黄银波 (泰州市产品质量监督检验所，江苏 泰州 225300) 摘 要：采用固相萃取提取肉制品中的苯甲酸、山梨酸，再用HPLC测定，采用保留时间定性，外标法定量。该 方法能有效去除肉制品中的脂肪干扰 ，最低检测含量为0．5mg·kg～，回收率在 94．3％-99．1％之间，重复测定的 RSD≤4％。该方法步骤简单、灵敏、准确，且使用的有机溶剂少。 关键词：固相萃取 ；苯甲酸；山梨酸；HPLC 中图分类号：O657．72 文献标识码：A 文章编号：1671—9905(2009)03—003503 在肉制品中，为防止受到微生物污染而腐败变 山梨酸、苯甲酸标准品。准确称取苯 甲酸、山梨 质，常需添加防腐剂来抑制微生物的增殖，以延长其 酸0．1g，分别置于 100mL容量瓶中，用石油醚 一 保藏期。但超范围添加和过量添加对人体是有害 乙醚 (3+1)混合溶剂溶解并稀释至刻度，即为每 的。我国国家标准GB2760—2007 食《品添加剂使 mL相当于 1．0mg苯 甲酸、山梨酸标准贮备液。香 用卫生标准》规定，肉制品加工中可以添加山梨酸 肠 (市售)。甲醇(色谱纯)，水 (Millipore超纯水)。 或山梨酸钾，使用量≤0．075g·kg-1；苯 甲酸在肉 1．2 色谱条件 制品中不得使用。目前，国标GB／T5009．29—2003 色谱柱：AtlantisdC】8液相色谱柱；流动相：0．02 规定的测定方法有气相色谱法、高效液相色谱法和 otol·L-1乙酸铵 一甲醇 (75+25)；流速：1．0mL· 薄层色谱法。其中薄层色谱法存在定量不准确的问 min’1；检测波长：235nin。 题，气相色谱法和高效液相色谱法适用于酱油和果 1．3 标准 曲线 汁中苯 甲酸、山梨酸的测定。由于该类物质含水较 配制浓度为5．0、10．0、20．0、50．0、100．0mg· 多，脂肪含量低，可提取后直接进样，检测容易。但 L 苯甲酸、山梨酸标准溶液。经过0．45 m滤膜 肉制品中含有大量的脂肪，传统提取净化方法很难 过滤后，取 10 L注入色谱仪中，以峰面积定量，作 将脂肪从提取溶液中去除，从而污染色谱柱。目前 出峰面积一浓度曲线。 有文献采用酸化后，用石油醚和乙醚提取山梨酸、苯 1．4 样 品溶液制备及测定 ， 甲酸，再在碱性条件下去除油脂，再次酸化后用石油 称取5．0g经组织捣碎机捣碎的香肠样品，置 醚和乙醚进行提取，用气相色谱仪氢火焰离子化检 于50mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，置于超声波 测器进行分离测定。但此法要使用大量的有机溶 清洗器中超声 10min，离心，取5．0mL上清液，用 剂，步骤繁琐，经过多步骤的提取，造成回收率偏低。 冰醋酸调pH=3．5。取一支C18固相萃取小柱，分别 本方法采用固相萃取来净化高脂肪样品，可以消除 用5mL甲醇和5mL水活化后上样，用5mL水清 脂肪的干扰，过程简单快速，使用有机溶剂很少，重 洗一次，再用3mL70％甲醇洗脱，收集洗脱液于5 现好，回收率高，是一种准确、可靠的检测肉制品中 mL具塞离心管中，用水稀释至刻度。经过0。45 苯甲酸、山梨酸的方法。 滤膜过滤后，取 10 L注入色谱仪中，