药学毕业论文--衍生化反相高效液相色谱法测定黄杨宁片中环维黄杨星D的含量.docVIP

衍生化反相高效液相色谱法测定黄杨宁片中环维黄杨星D的含量 【摘要】 　　目的建立反相高效液相色谱法（RP－HPLC）测定黄杨宁片中环维黄杨星Ｄ的含量。方法环维黄杨星Ｄ与异氰酸苯酯反应后,用RP-HPLC测定,色谱柱为ODS-C18柱;流动相为甲醇－水(84∶16);检测波长：234 nm。结果衍生化反应在23.03~53.73 μg·ml-1浓度范围内线性良好，r=0.999 8（n＝5）,回收率均值96.1％,重复性好。结论该法准确,可靠，专属性强,可用于黄杨宁片中环维黄杨星Ｄ的质量控制。 【关键词】 黄杨宁片 环维黄杨星Ｄ 异氰酸苯酯 反相高效液相色谱法 衍生作用 　　Abstract：ObjectiveTo develop an RP-HPLC method for quantitative determination of Cyclovirobuxine D in HuangYangNing tablets. MethodsCyclovirobuxine D reacted with a derivative reagent phenyl isocyanate in chloroform.The analysis was carried out on C18 column,the mobile phase was methanol-water(86∶14),and the detection wavelength was at 234 nm.ResultsGood linearity was obtained from 23.03 μg·ml-1 to 53.73 μg·ml-1 of cyclovirobuxine D derivatives with a correlation coefficient of 0.999 8.The average recovery was 96.1%,RSD=1.5%.ConclusionThe method is accurate,reliable and specific and can be used for the quality control of Huangyangning tablets. 　　Key words：Huangyangning Tablets; Cyclovirobuxine D; Phenylisocyanate; RP-HPLC; Derivatization 　　黄杨宁片中主要成分为环维黄杨星Ｄ，环维黄杨星Ｄ系从黄杨科植物小叶黄杨Buxus minrophlla Sieb. et Zucc. var.SincaRehd. et Wils.及其同属植物中提取精制所得,主要用于冠心病及心绞痛的治疗。由于本品系从植物中经多次提取制备,原料中含有一定量的结构相似生物碱,《中国药典》原料用非水滴定法,片剂用酸性染料比色法, 测定的均为总生物碱,专属性差。根据其结构含仲氨基的特点,本文用异氰酸苯酯为衍生化［1］试剂,用高效液相紫外检测器方法测定黄杨宁片中环维黄杨星D的含量,现报道如下。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器岛津UV-2401紫外可见分光光度计；Agilent1100高效液相色谱仪系统，包括四元泵系统，紫外检测器，色谱数据化学工作站。 　　1.2 制剂及对照品环维黄杨星D对照品，中国药品生物制品检定所提供， 批号110888-200202；黄杨宁片，江苏苏中药业集团股份有限公司生产（规格：1mg/片；批号060404，060406，060407），衍生化试剂异氰酸苯酯为Acros Organics，Belguim产品，色谱用水为蒸馏水，甲醇为色谱纯，其它试剂为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件色谱柱为岛津ODS C18柱(150 mm×4.6 mm)；流动相为甲醇-水(84∶16)；流速1.0 ml/min；检测波长234 nm；柱温为室温；进样量20 μl。 　　2.2 测定方法 　　2.2.1 衍生化试剂的配制精密吸取异氰酸苯酯20 μl，置10 ml量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2.2.2 对照品溶液的制备取环维黄杨星D对照品10 mg，精密称定，置25 ml量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1 ml，置10 ml量瓶中，加衍生化试剂0.2 ml，摇匀，室温放置30 min，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2.2.3 供试品溶液的制备 取本品20片精密称定，研成细粉，精密称取适量（约相当于环维黄杨星D10 mg），置具塞锥形瓶中，加0.5％冰醋酸溶液40 ml，50℃加热超声（250 W，40 kHz）2 h，取出，放冷，离心6 min（3 000 r/min），小心倾取上