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推导；表观米氏常数 * * * * 反馈抑制 * * 一. 非专一性不可逆抑制作用 概念：抑制剂能和酶上的一类或几类基团反应。 既与必需基团又与非必需基团反应，甚至与不止一种侧链基团反应 类型： 酰化剂、烃基化剂、含活泼双键的试剂、有机磷化合物、亲电试剂、 氧化剂、 还原剂 一. 非专一性不可逆抑制作用 有机磷农药杀虫机理：抑制昆虫乙酰胆碱酯酶活性 有机磷化合物与酶活性直接相关的丝氨酸上的羟基牢固的结合，从而抑制某些蛋白酶和酯酶。 有机磷杀虫剂（敌敌畏、敌百虫等）抑制生物体神经突触后膜上的乙酰胆碱酯酶，造成突触间隙乙酰胆碱的积蓄，持续地作用于受体，引起一系列反应使病虫神经过度兴奋而死亡。可经消化道、呼吸道及皮肤、年末进入人体，可导致中枢神经系统抑制、心脏活动抑制等中毒症状。 乙酰胆碱是一种神经递质，作用于各类胆碱受体，进入突出间隙的乙酰胆碱作用于突出后膜，引起后膜产生动作电位，随后被胆碱酯酶水解为胆碱和乙酸。 少数胆碱酯酶抑制剂可用于治疗阿兹海默症 二． 专一性不可逆抑制剂 1． Ks型结合型不可逆抑制剂 2． Kcat型催化型不可逆抑制剂（自杀底物） 1． Ks型结合型专一性不可逆抑制剂 抑制剂具有和底物类似的结构，与相应的酶结合，每种特定抑制剂对酶的特定基团（包括酶活性部位的必需基团）作用是专一的，亦可修饰酶分子其它部位的同类基团。——根据底物化学结构设计 举例：三种丝氨酸蛋白酶： 胰凝乳蛋白酶-结合芳香族氨基酸，对甲苯磺酰-L-苯丙氨酰氯甲酮 弹性蛋白酶-结合侧链较小的氨基酸（Ala，Gly，Leu，Ile） 胰蛋白酶-结合长的碱性氨基酸（Lys，Arg）侧链，对甲苯磺酰-L-赖氨酰氯甲酮 主要用于通过对酶蛋白的亲和标记来研究酶活性中心结构。在抑制剂上引入某种具有特殊光学性质的基团，而这些基团又可以随酶分子局部微环境的不同而改变，那么这些“报告基团”可以报告活性部位微环境的性质 2． Kcat型催化型不可逆抑制剂（自杀底物） 抑制剂是根据酶的催化过程来设计或天然存在的，它们与底物类似，既能与酶结合，也能被酶催化发生反应，在其分子中存在潜伏基团，该基团会被酶催化而激活，并立即与酶活性中心某基团呈不可逆结合，使酶受抑制 每一种自杀底物都有其专一的作用酶对象 天然酶的自杀底物 治疗用人工合成的酶自杀底物 2． Kcat型催化型不可逆抑制剂（自杀底物） Ackee(Blighia sapida) 植物——未成熟果实的假种皮中含有一种有毒的降糖氨酸（即甲叉环丙基丙氨酸），其代谢产物是脂酰CoA脱氢酶自杀底物，导致葡萄糖和脂肪酸氧化发生不平衡，出现低血糖症 （1）天然酶的自杀底物 （2） 治疗用人工合成的酶自杀底物 在肿瘤治疗上 治疗震颠麻痹症 高血压： 迫降灵——β-γ-丙炔基叔胺类衍生物，单胺氧化酶的自杀底物。β-羟酪胺是一种假神经递质，可以代替去甲基肾上腺素而被积聚以及释放，使交感神经末梢释放的去甲基肾上腺素减少，导致血压下降。而单胺氧化酶可以破坏酪胺，使得酪胺不能进入血液循环。 癫痫： γ-乙烯代氨基丁酸——γ-氨基丁酸转氨酶自杀底物。γ-氨基丁酸酶可破坏脑中一种抑制性的神经递质γ-氨基丁酸，从而导致癫痫病的发作。 第五节结束 非专一性的不可逆抑制作用 专一性不可逆抑制剂的类型 酰化剂 烃基化剂 含活泼双键的试剂 亲电试剂 氧化剂 还原剂 Ks型专一性不可逆抑制剂 Kcat型不可逆抑制剂（自杀底物） 第六节 酶抑制剂的应用 一 医学上的应用 二 农业生产上的应用 三 工业生产上应用 1．医学上应用- 青霉素类药物 作用于细菌的细胞壁，使细胞壁合成受阻 人类细胞没有细胞壁，因此不会对人体产生影响 1． 青霉素类药物 青霉素的结构与革兰氏阳性菌细胞壁成分的粘肽机构中的D-丙氨酰-D-丙氨酸近似，可与后者竞争转肽酶，阻碍四肽侧链和五肽交联桥的形成，造成细胞壁的缺损，是细菌失去细胞壁的渗透屏障，最终起到杀灭细菌的作用。 革兰氏阴性菌缺乏五肽交联桥。 一 医学上的应用 青霉素类药物 长期使用青霉素，细菌中产生β-内酰胺酶，可水解青霉素中的内酰胺环，使之成为不杀菌的青霉酸酰。（不能形成D-丙氨酸-D-丙氨酸结构，丧失了杀菌能力） 对付办法：已合成了几个β-内酰胺酶的自杀底物，如：一种青霉素的亚砜衍生物，能和抗性细菌的β-内酰胺酶结合使酶自杀，就可再用青霉素。 传统化学法生产β－内酰胺抗生素路线 图 1.1 传统化学法生产β－内酰胺抗生素路线 Figure 1.1. An overview of the traditional, chemical synthesis of β-lactam antibiotics 酶法生产β-内酰胺类抗生素路线图 图 1.2 酶法生产β-内酰胺类抗生素路线图 Figure