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免疫学实验酶联免疫吸附试验（ELISA） * 一、实验原理 利用标记技术,将酶标记到抗体(抗原)上,使待检 物中相应的抗原(抗体)与酶标记抗体(抗原)发生特异 反应。在遇到相应的酶底物时,酶能高效、专一催 化、分解底物,生成有颜色的深、浅、有、无可以判 断待检物中有无特异的抗原(抗体)及量的大小。本 试验可定性、定量、定位。同时具有敏感、特异、 简便、无需特殊设备的一种微量测定技术。 其种类按检测目的可分: 间接法----测抗体（图示） 双抗体夹心法----测抗原（图示） 竞争抑制法----测抗原 二、实验目的 1、掌握免疫标记技术的概念，常用的标记物； 2、掌握酶联免疫吸附试验的实验原理、常用于标记的酶和操作方法； 3、了解酶联免疫吸附试验的应用。 三、实验材料 1、 HBsAb （乙肝病毒表面抗体） 包被反应孔； 2、阳性对照、阴性对照、待检血清； 3、酶标抗体； 4、显色液A与B。 5、洗涤液 四、实验方法 1、将微孔编号； 2、加样：分别加待检血清和阴、阳性对照血清1滴于相应孔中； 3、每孔加酶标抗体各1滴； 4、温育：振荡混匀，置37℃ 20 min； 5、洗涤：甩去孔内液体，拍干，用洗涤液注满各孔，静置15 s，甩干，重复5次后拍干； 6、显色：每孔加显色剂A、B各1滴振荡混匀，37℃放置15min。 7、终止：每孔加终止液1滴。 五、实验结果 观察各孔显色情况，有明显蓝色（终止后为黄色）者为阳性，无色者为阴性。 *