环磷酰胺作用B细胞非霍奇金淋巴瘤对抑癌基因PTEN的影响-安徽医药.PDFVIP

·１８６８· 安 徽 医 药　ＡｎｈｕｉＭｅｄｉｃａｌａｎｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌ　２０１７Ｏｃｔ，２１（１０） 环磷酰胺作用Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤对抑癌基因ＰＴＥＮ的影响 １ ２ １ ２ 何伟 ，葛自力 ，刘世杰 ，祝华臖 （１．青海省人民医院颌面外科，青海 西宁　８１０００７；２．苏州大学第一附属医院口腔科，江苏 苏州　２１５１０６） 摘要：目的　探索环磷酰胺作用非霍奇金淋巴瘤对抑癌基因ＰＴＥＮ的影响，为治疗 Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤寻找新治疗途径提 供实验依据。方法　免疫沉淀（ＩＰ）技术提取细胞中的ＰＴＥＮ蛋白，采用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法分别检测不同时间（１０、３０、６０ －１ ｍｉｎ）不同浓度的环磷酰胺（０、２５、５０ ｍｏｌ·Ｌ ）作用Ｎａｍａｌｗａ细胞株时ＰＴＥＮ基因的活性；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ技术检测ＰＴＥＮ，磷酸 μ 化ＰＴＥＮ，Ａｋｔ及磷酸化Ａｋｔ的表达；基因芯片技术筛选环磷酰胺作用Ｎａｍａｌｗａ细胞后基因表达谱的改变；ｑＰＣＲ技术检验基因 谱表达的改变。结果　不同浓度的环磷酰胺作用Ｎａｍａｌｗａ细胞后ＰＴＥＮ活性降低；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显出磷酸化ＰＴＥＮ及磷酸 化Ａｋｔ表达降低；基因芯片筛选发现上调的基因有１３个，下调的基因有１６个。环磷酰胺作用Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤Ｎａｍａｌ ｗａ细胞后引起基因表达谱广泛改变。对差异基因的分析得出环磷酰胺作用Ｎａｍａｌｗａ细胞引起基因表达谱重要信号通路上基 因的改变。结论　环磷酰胺治疗Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤具有较低的缓解率，可能与环磷酰胺作用细胞使ＰＴＥＮ基因活性减 弱，同时引起信号通路上基因表达改变有关。 关键词：环磷酰胺；Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤；ＰＴＥＮ基因；活性 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－６４６９．２０１７．１０．０３１ ＣｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅｒｏｌｅＢｃｅｌｌｎｏｎＨｏｄｇｋｉｎ′ｓｌｙｍｐｈｏｍａｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅＰＴＥＮ １ ２ １ ２ ＨＥＷｅｉ，ＧＥＺｉｌｉ，ＬＩＵＳｈｉｊｉｅ，ＺＨＵＨｕａｊｕｎ （１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒａｌａｎｄＭａｘｉｌｌｏｆａｃｉａｌＳｕｒｇｅｒｙ，ＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｘｉ′ｎｉｎｇ，Ｑｉｎｇｈａｉ　８１０００７，Ｃｈｉｎａ； ２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＳｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｕｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｕｚｈｏｕ，Ｊｉａｎｇｓｕ　２１５１０６，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅＰＴＥＮｏｎｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅｔｒｅａｔｎｏｎＨｏｄｇｋｉｎｌｙｍｐｈｏｍａａｎｄｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｅｖｉｄｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＢｃｅｌｌｎｏｎＨｏｄｇｋｉｎ′ｓｌｙｍｐｈｏｍａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＩＰｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｅｘｔｒａｃｔｅｄｔｈｅＰＴＥＮｐｒｏ ｔｅｉｎｆｒｏｍｃｅｌｌｓ．ＴｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＰＴＥＮｇｅｎｅｉｎＮａｍａｌｗａｃｅｌｌｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＨＰＬＣａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅ（１０，３０，６０ｍｉｎ）ａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔ －１ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ（０，２５，５０ ｍｏｌ·Ｌ ）．ＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅＰＴＥＮ μ ａｎｄＡｋｔ．Ｇｅｎｅｃｈｉｐｓｃｒｅｅｎｉ