微生物检测实习.docVIP

一、实习时间、地点和实习单位 实习时间：2014年6月9日-2014年6月20日 实习地点：生化系实验室 实习单位：邵阳学院 二、实习过程概述 2014年6月9日：实习动员大会 2014年6月10日-2014年6月13日：查找资料，制定方案 2014年6月15日：酸奶中酸度的测定 2014年5月16日：酸奶中脂肪的测定 2014年6月17 日：酸奶中蔗糖的测定 2014年6月 18日：酸奶中非乳脂总固体的测定 2014年6月19 日：酸奶中蛋白质的测定 2014年6月20日：实验数据的统计分析 实习内容 课题名称：酸奶质量分析与检验 实验一 酸度的测定 （一）、实验目的 1、熟练氢氧化钠标准溶液的配制和标定； 、掌握直接滴定法测酸度的方法。 酸度是指中和100g样品所需0.1000?mol/L氢氧化钠标准溶液的体积（mL）。以酚酞为指示液，用0.1000?mol/L标准溶液滴定10?g 1、酚酞指示液：称取0.5g酚酞75m体积分数95%的乙醇中，并加入20mL?水，然后滴加氢氧化钠溶液至微粉色，再加入水定容至100?mL。 2、0.1?mol/L氢氧化钠标准溶液(250ml):准确称取1g氢氧化钠固体加水溶解稍冷却后转入250? ml容量瓶中定容，充分摇匀。分析天平，碱式滴定管（2个）200mL的锥形瓶（2个）量筒（1个）移液管（1个）吸尔球玻璃棒1、氢氧化钠溶液的标定： ?、准确称取0.40～0.50g基准试剂邻苯二甲酸氢钾三份,置于锥形瓶中标号， ?、加20～30?mL蒸馏水溶解后，加1滴酚酞指示剂。 、用配制好的氢氧化钠溶液分别滴定至溶液呈微红色，30?s?内不褪色。记录每次消耗 的氢氧化钠溶液的体积数，计算。 2、酸度的测定：?①、称取10g（精确到0.001?g）样品，置于150?mL?锥形瓶中。 ?、加20?mL蒸馏水，混匀。 ?、再加入2.0?mL?酚酞指示液，混匀。 ?、用氢氧化钠标准溶液滴定至微红色并0s内不褪色。记录消耗的氢氧化钠标 准溶液的体积数，重复三次。 式中： X2——试样的酸度，单位为度（oT）； c2——氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度，单位为摩尔每升（mol/L ）； V2——滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积，单位为毫升（mL ）； m2——试样的质量，单位为克（g）； 0.1——酸度理论定义氢氧化钠的摩尔浓度，单位为摩尔每升（mol/L ）。 （七）、实验数据及记录 试样一 试样二 试样的质量 9.986 9.981 V2滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积 7.68 7.65 X2试样的酸度，单位为度（oT） 76.91 76.65 国标中发酵乳酸度≥70g/100g，所以该酸奶符合国家标准 实验二 蔗糖的测定 （一）、实验目的 掌握盐酸水解法测定蔗糖的方法和原理 （二）、实验原理 1、样品脱脂后，用水或乙醇提取，提取液经澄清处理以除去蛋白质等杂质，再用盐酸进行水解，是蔗糖转化为还原糖。然后按还原糖测定方法分别测定水解前后样品液中还原糖量，两者差值即为由蔗糖水解产生的还原糖量，即转化糖含量，乘以换算系数即为蔗糖含量。 2、一定量的酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成蓝色氢氧化铜沉淀，沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的酒石酸钾钠铜络合物。样品经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，用样品液滴定，样品液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，将其中的二价铜还原生成红色氧化亚铜沉淀，稍微过量的还原糖立即将次甲基蓝还原，溶液蓝色消失，以此为滴定终点。根据含还原糖样品液滴定的体积，就可计算样品中还原糖的含量。 （三） 式中：X ——样品中还原糖的含量(以葡萄糖计)，%； m1——10ml碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，mg； m2——样品质量，g； V1——测定时消耗样品溶液的平均体积，ml V2——测定是消耗未经过水解的样品稀释体积 ml （六）、实验记录及数据处理 实验编号 1 2 标定消耗体积V0/ml 12.98 12.99 标定平均消耗体积 12.985 m1—10m碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量 13.15 13.20 样品质量m2/g 3.543 3.544 滴定时消耗体积V2/ml 17.70 17.80 消耗体积V1/ml 无论多少不变化 无论多少不变化 蔗糖含量 9.96％ 9.94％ 平均蔗糖含量 9.95％ 实验三 酸奶中脂肪含量的测定 （一）、实验目的 熟悉酸奶中脂肪含量的测定方法及应用范围； 掌握酸水解法测定脂肪含量的方法