人牙周膜成纤维细胞论文：塞来昔布对IL-1βyou导下人牙周膜成纤维细胞中COX-2、IL-8表达的影响.docVIP

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2017-12-15 发布于河北
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人牙周膜成纤维细胞论文：塞来昔布对IL-1βyou导下人牙周膜成纤维细胞中COX-2、IL-8表达的影响.doc

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人牙周膜成纤维细胞论文：塞来昔布对IL-1βyou导下人牙周膜成纤维细胞中COX-2、IL-8表达的影响

人牙周膜成纤维细胞论文：塞来昔布对IL-1β诱导下人牙周膜成纤维细胞中COX-2、IL-8表达的影响【中文摘要】（1）观察不同浓度IL-1β诱导下人牙周膜成纤维细胞中COX-2的表达情况。（2）观察塞来昔布对IL-1β诱导的人牙周膜成纤维细胞表达COX-2和IL-8的影响，为探讨塞来昔布控制牙周组织炎症的临床应用提供实验依据。方法：（1）体外原代培养人牙周膜成纤维细胞，并对其来源进行鉴定。（2）选取5～8代人牙周膜成纤维细胞，随机分为正常对照组和实验组，正常对照组加入无血清培养液，实验组分别加入含0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml IL-1β的无血清培养液，采用免疫组织化学方法和ELISA法检测HPLFs中COX-2的表达状况，并探寻实验浓度范围内，引起最强炎症的IL-1β浓度。（3）选取5～8代人牙周膜成纤维细胞，随机分为对照组和实验组，实验组为在含10ng/ml IL-1β的无血清培养基中分别加入0μM、10μM、25μM、50μM、100μM以二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）助溶的塞来昔布；对照组为含有同样浓度DMSO的无血清培养基。采用ELISA法检测塞来昔布对IL-1β诱导下人牙周膜成纤维细胞中COX-2和IL-8表达情况的影响。结果：(1)体外成功的培养人牙周膜成纤维细胞，倒置显微镜下：细胞为长梭形或者星形，呈典型的成纤维样细胞形态；免疫组织化学染色：人牙周膜成纤维细胞抗角蛋白染色阴性，抗波形丝蛋白染色阳性，表现出来源于中胚层的成纤维样细胞特性。(2)不同浓度的IL-1β干预人牙周膜成纤维细胞后COX-2表达的免疫组化结果显示：正常对照组中COX-2呈阴性表达，经IL-1β诱导后的人牙周膜成纤维细胞中COX-2在胞浆和核膜呈阳性表达；且COX-2表达强度随IL-1β诱导浓度的升高呈现增强的趋势（P0.05）。ELISA检测结果同样证实了COX-2的表达随IL-1β诱导浓度的升高而增强（P0.05）。（3）塞来昔布对经IL-1β诱导下HPLFs中COX-2表达影响的实验显示：不同浓度的塞来昔布均可减少致炎后HPLFs中COX-2的表达，与未加药组比较，P0.05；且随着塞来昔布浓度的增加，HPLFs中COX-2表达呈现逐渐递减的趋势，实验各组间比较，P0.05。对IL-8表达影响的实验显示：加有不同浓度塞来昔布的各实验组中，IL-8表达均有不同程度的减少，除10μM组外，其他加药组与未加药组比较，P0.05；当塞来昔布的浓度在25μM内时，IL-8的表达随着塞来昔布浓度的升高而减少，在25μM时其表达最弱，与对照组比较，P0.05；当塞来昔布的浓度大于25μM时，IL-8的表达随着塞来昔布浓度的增加有小幅度的增高，但组间比较，差异无统计学意义，P0.05。结论：(1)组织块培养法培养牙周膜成纤维细胞步骤简单易掌握，可为探讨牙周组织相关疾病提供实验条件。（2）IL-1β诱导人牙周膜成纤维细胞后有COX-2表达，且COX-2的表达强度与IL-1β浓度呈正相关关系，说明COX-2与牙周病的发生发展存在一定关系。(3)塞来昔布可有效减少经IL-1β干预后的人牙周膜成纤维细胞中炎症因子COX-2和IL-8的表达。【英文摘要】: (1) To observe the expression of Cyclooxygenase 2 (COX-2) in Human periodontalligament fibroblasts (HPLFs) by the interference of IL-1βwith different concentrations. (2) Toobserved the inhibition of COX-2 and IL-8 producing by specific concentration ofIL-1β-induced HPLFs with varied concentrations of celecoxib，which offer experimentalfoundation for the clinical use of celecoxib to treat periodontitis.Methods: (1) Culture the primary HPLFs in vitro and identify them. (2) Experiments werecarried out with cells from the fifth to eighth passages. It抯 randomly divided into control andexperimental groups, the control group