玉米肽的醒酒活性体外试验及其醒酒机理研究 A Study on Mechanism and Tests in vitro for Corn Peptides Facilitating Alcohol Metabolism.pdfVIP

2008年9月 中国粮油学报 V01．23，No．5 Cerealsand Association 第23卷第5期 JournaloftheChinese Oils Sep．2008 玉米肽的醒酒活性体外试验及其醒酒机理研究 隋玉杰 何 慧 石燕玲 王 进 (华中农业大学食品科技学院，武汉43(X)70) 摘要为研究玉米肽的醒酒机理，找到筛选高醒酒活性玉米肽的便捷的体外试验方法，考察了在体外 试验中，玉米肽对乙醇脱氢酶(ADH)活力的影响及对羟基自由基(·OH)的清除作用，并与动物试验比较，结果 显示三种方法基本吻合。玉米肽在体外试验中可激活ADH，具有良好地抑制·OH的能力，玉米肽中含有较高 比例的丙氨酸、亮氨酸，尤其是亮氨酸。结论：可以通过测定玉米肽对ADH的激活率及对·OH的抑制率这两 个体外试验，从不同蛋白酶酶解玉米肽及不同水解度的玉米肽中筛选出高醒酒活性肽。玉米肽的醒酒作用机 制与其能激活ADH、清除·OH及其较高比例的丙氨酸、亮氨酸组成有关。 关键词 玉米肽 醒酒 机理体外试验 乙醇脱氢酶羟基自由基 长期过量饮酒或一次性大量饮酒会导致乙醇脱 氢酶(ADH)活性降低，使血液中乙醇浓度提高，乙醇 的生物利用度提高，进而加重乙醇对脑、肝脏等器官 酶I(NAD+)：上海伯奥生物科技有限公司(进口分 的危害作用¨J。Yamaguchi等率先报道了玉米肽具有装)；乙醇脱氢酶(A工}H)、脱氧核糖：美国Sigma公司。 促进乙醇代谢的醒酒作用，可明显降低原发性高血 1．2主要仪器 压大鼠血液中乙醇及其氧化产物乙醛浓度的作 日立835—50氨基酸自动分析仪：日本13立公 用…2，同样的结果在健康人中也得到了印证【3J3。Ya—司；岛津UV一102—02WF紫外可见分光光度计：日本 maguchi等指出玉米肽的醒酒作用源于其可显著提高岛津公司。 血清中丙氨酸、亮氨酸的浓度，它们有助于产生稳定 1．3实验方法 的辅酶(NAD+)，从而抑制血液中乙醇浓度的升 1．3．1粗蛋白含量的测定：微量凯氏定氮法。 高旧J。目前对于玉米肽醒酒机理的研究报道不多， 1．3．2浓缩玉米蛋白酶解正交试验 揭示玉米肽的醒酒机理或筛选高醒酒活性玉米肽， 选定中性蛋白酶水解条件为pH7．3，温度50℃； 常需进行动物试验，由于动物试验、人体试验不但周 碱性蛋白酶水解条件为pH8．3，温度60℃。采用b 期长，且所做组数受到试样用量、费用及法律的限 (33)正交表，选酶解时间、酶底比、料液比为三因素， 制，本文采用瓦勒一霍赫法¨J并稍加改良后，通过体 根据茚三酮法测得的吸光度值粗略比较水解程度， 外试验测定ADH的活性，旨在考察玉米肽对ADH酶 经单因素试验，确定了6(33)正交表中三因素的三个 活的影响，研究玉米肽的醒酒机理，结合体外抑制羟 水平，见表l、表2。 基自由基(·OH)试验、动物试验，试图找到筛选高醒 1．3．3水解度(DHV)的测定16J： 酒活性玉米肽的便捷的体外试验方法。 10,,白蛋米玉缩浓g —95～100oc下加热30mill一 冷却一分别用两种蛋白酶水解，水解完毕后一于 1 材料与方法 90℃灭酶10min，测定酶解物的水解度。 1．1主要材料 DH=h／Ih= 玉米蛋白粉：正大集团武汉分公司(粗蛋白含量