[医学保健]DNA复制.pptVIP

第一节 概述 第二节 原核生物基因组的复制 第三节 真核生物基因组的复制 第四节 基因组复制的调控 (4) 线性DNA 双链的复制 单一起点、单向,如:腺病毒 单一起点、双向,如:T7噬菌体 多个起点、双向 d、真核生物复制起点 酵母DNA的复制起点 ? 酵母复制起点的鉴定方法 ? 酵母的复制起点称为:自主复制顺序(autonomously replicating sequence,ARS) ? 酵母ARS已鉴定四个亚功能域: 5.叶绿体基因组的复制 真核生物基因组的复制在2个水平受到调控: 复制必须与细胞的分裂周期相协调; 复制过程在某些条件下会暂停,以免将突变传递给下一代; 细胞周期及细胞分裂关卡(cell cycle checkpoints) S期的起始时间的控制 由前复制复合物(Pre-Rc)在复制起始点的组装决定. 参与前复制复合物组装的3种蛋白质: ? Cdc6p(一类与细胞分裂周期有关的蛋白) G2结束时合成; 与染色体结合时期:G2结束 → M →G1早期; G1末期消失; ? RLF(replication litensing factors,复制资格因子) 属于MCM家族成员; 与染色体结合时期: M末期 → S期开始前 ? Cdt1 与另一个DNA起始复制抑制因子geminin结合,阻止Pre-Rc复合物的组装; Pre-Rc组装的调节 Pre-Rc组装的过程 细胞周期关卡的作用: 本章主要问题: DNA半保留复制的机制; 复制叉诞生的过程如何,后随链上都包含哪些事件(涉及的酶的情况); E.coli的DNA复制机制; 原核生物线性DNA复制5’末端短缩的解决办法有哪几种; 真核生物端粒末端及端粒酶在DNA末端复制过程中的作用机制; 真核生物基因组的复制如何进行调控? G G hoogsteen 氢键 三螺旋DNA G链 –T2G4-----TTGGGG TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGG C链--A2C4----- G链 –T2G4-----TTGGGG t t g g g g t t g C链--A2C4----- AACCCCAA g g g g t t g g g Primase AACCCC AACCCCAACCCCAACCCCAACCC DNA pol or G链 –T2G4-----TTGGGG TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGG C链--A2C4----- 实验表明－－人体细胞通过监测失去的端粒的重复数而计数细胞分裂次数,当端粒长度下降到某一临界值时,细胞终止分裂－－－衰老、死亡 “多莉”的衰老 研究端粒丢失的速率,预测人类的寿命 研究推测端粒酶与肿瘤的关系 4、线粒体DNA的复制 真核生物DNA聚合酶γ 主要存在于线粒体或叶绿体,复制粒体DNA时,其中一条链先开始。复制到2\3时,第二条链(L)才开始复制。 第四节 基因组复制的调控 细胞分裂关卡 细胞分裂关卡 细胞分裂关卡: 紧接在S期和M期之前的时期被认为是关键控制点 1. 基因组复制与细胞分裂 细胞周期蛋白 激活依赖细胞周期蛋白激酶的蛋白激酶 抑制蛋白 蛋白质激酶 细胞分裂中起专门作用的酶或蛋白质 细胞分裂 磷酸化激活 2. 细胞S期的调控 早期复制和晚期复制的差别起始 活跃转录的基因 → S初期复制 非转录区 → S晚期复制 着丝粒 → 染色体中复制最晚的部位 S期中的细胞周期关卡: 复制叉的蛋白发现损伤DNA → 发出紧急信号 → 细胞周期蛋白作出反应 →调节酶抑制S期晚期激活复制起点的”点火” 监控DNA的损伤 通过关卡 不通过关卡 DNA被复制 直到DNA被修复 进入程序性细胞死亡或调亡 例如: 指导细胞周期暂停或调亡的核心成员p53 → 缺陷 → 导致癌变 一分子的 DNA pol III. 协同合成前导链和后随链 The βsubunit of DNA polymerase III consists of a head to tail dimer that forms a ring completely surrounding a DNA duplex. (3)复制终止 a、终止序列 E.coli 有两个终止区域,分别结合专一性的终 止蛋白 序列一:terE