铵态氮的测试方法.docVIP

氮的测试方法 1.铵态氮采用靛酚蓝比色法测定硝态氮采用联氨铜还原比色法测定， 亚硝态氮采用重氮化偶合分光光度法测定。 氨态氮测定:采用氯化钾浸提一氧化镁蒸馏法; 亚硝态氮测定:N一(l一蔡基)乙二胺光度法; 硝态氮测定:氯化钾浸提一还原蒸馏法; 有机态氮测定:凯氏定氮法。 有机氮测定采用硫酸消化一蒸馏法(即凯氏定氮法): 无菌移液管移取 5mL细菌培养液，加入浓硫酸和催化剂(硫酸铜、硫酸钾)，400℃消化1小时后，凯氏定氮仪中加入40%氢氧化钠蒸馏，4%硼酸液吸收后，0.!m。l/L盐酸滴定。 有机氮的计算公式为:X=(V，一 VZ)xCx14.007x1000/5 X—为样品中有机氮含量(m创L);v，—样品消耗盐酸标准液的体积(mL);vZ— 空白试验消耗盐酸标准液的体积(mL);C一盐酸标准溶液通过标定后的摩尔浓度(Inol/L)。 按态氮测定采用蒸馏法:用无菌移液管移取mL细菌培养液培养液，加IOmL氢氧化钠溶液凯氏定氮仪蒸馏，4%硼酸吸收后，用0.lmol/L盐酸滴定，计算含量。 钱态氮的计算公式为:A二(V，一 VZ)xCx14.007x1000/5 A—为样品中钱态氮含量(m叭);Vl—样品消耗盐酸标准液的体积(mL);vZ— 空白试验消耗盐酸标准液的体积(mL);C一盐酸标准溶液通过标定后的摩尔浓度(mol/L)。 亚硝酸盐氮测定采用a一蔡胺分光光度法: 弱酸条件下:对氨基苯磺酸与a一蔡胺偶合生成紫红色染料，其颜色深度与亚硝酸盐氮含量成正比。可测定亚硝酸盐氮含量范围在0.05m叭之间，若超过该范围可稀释后测定。 取适量培养液稀释后，依次加入氯化按缓冲液、60%冰乙酸、对氨基苯磺酸和a一禁胺等体积混合液和蒸馏水，于550nm波长下进行比色测定，同时绘制标准曲线，计算含量。硝酸盐氮测定采用磺基水杨酸消化法: 在浓硫酸存在下，NO3“能与磺基水杨酸反应，生成硝基水杨酸。所生成的硝基水杨酸在碱性条件(PH12.0)条件下，于410nm处有最大吸收;并且，在一定范围内与N03’含量成线性关系。此外，NoZ一、NH4十、CI.等离子基本无干扰影响。 取适量培养液稀释后，加入磺基水杨酸溶液后静置10min后再加入氢氧化钠(Zmof/L)溶液，待冷却后，于41Onm波长下进行比色测定，同时绘制标准曲线，计算含量。 1.3.2.1堆制过程中温度测定每天于上午8:oo和下午2:00分别测定距离堆肥表 层20em、40em和60em处的温度，重复三次。 1.3.2.2堆制样品浸提液的制备 堆制样品浸提液的制备:称取10.009鲜样，加入100mLZm。比KCI，振荡3omin，离心(5，000:·min-，)，过滤，取滤液即为浸提液。 1.3.2.3堆制过程中钱态氮测定方法 态氮采用靛酚蓝比色法测定【’9，l。 态氮测定原理:用2mol.L一‘KCI溶液浸提钱氮，浸提液中的按氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成颜色稳定的水溶性染料靛酚蓝，在含氮0.05一0.5mg。L一’范围内可比色测定。 分析步骤:吸取浸提液进行适当稀释，取稀释液2ml~10ml(含按氮2ug~25ugl 放入50ml容量瓶中，用氯化钾溶液补充至10ml，然后加入5ml苯酚溶液和次氯酸钠碱性溶液5ml，摇匀。加1ml掩蔽剂后定容，然后在40℃水浴下水浴30min后，在625nm波长处比色，读取吸光度。同时制作工作曲线。 13.2.4堆制过程中硝态氮的测定方法 硝态氮采用还原比色法测定I’9’]。 硝态氮测定原理:硝态氮(nitrate)和硫酸联氨(勿drazinesulphate)在碱性条件下， 以铜离子(copperinns)为催化剂，被还原成亚硝态氮(nitrite)。亚硝态氮(nitrite)和磺胺(sulfanllamide)在酸性条件下生成重氮化合物(diazocomPound)，重氮化合物然后与N一l一蔡乙二胺盐酸盐困一(l一NaPdthyl)ethylenediaminedi勿droehioride)形成红色的偶氮染料(reddish一p呷leazodye)，该染料在52olnn波长处有最大吸收，进行比色测定。吸取smlo.Zmol·L一’氢氧化钠于25ml容量瓶中，加入2.0ml浸提液(硝态氮含量高时应适当稀释)再加入2.0ml联氨铜溶液试剂，摇匀后在30℃水浴中水浴IOmin，在加入2.oml磺胺显色，在520lun波长处比色测定吸光度。同时制作工作曲线。 1.3.2.5挥发性氨的测定方法 挥发性氨采用改进的扩散皿法测定〔’9l]:称取鲜样2.09于扩散皿外室，轻轻地旋 转使样品均匀地铺平。再取10.0ml的2%硼酸(，刀v)放于扩散皿内室，加2滴硼酸指示剂，然后在扩散皿外室边缘涂上碱性胶液，盖上毛玻璃旋转数次，使皿边与毛玻璃完全粘合。分别