- 1、本文档共4页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
保健食品增强免疫力的评价方法
保健食品增强免疫力的评价方法
一、实验内容:
细胞免疫
体液免疫
非特异性免疫功能
NK细胞活性
二、评价指标
体重和免疫脏器重量的测定:
称量实验动物在实验的初,中,终期的体重,测量胸腺和脾脏重量,评价受试动物的一般情况,脏器/体重比,包括胸腺/体重比,脾脏/体重比
细胞免疫功能测定:
小鼠脾淋巴细胞转化实验
迟发性超敏反应(DTH)
体液免疫功能
抗体生成细胞检测
血清溶血素测定
单核/巨噬细胞功能测定
小鼠廓清实验
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验
NK细胞活性测定
三、动物选择
正常或免疫功能低下的模型动物进行实验。
一般选择小鼠,品系不限,推荐使用近郊系动物,性别为单一性,6-8W,体重18-22g。
动物数量每组10-15只,清洁级以上。
四、实验剂量
至少设3个剂量组,另设空白对照组,也可加阳性对照组。
尽可能找出最低有效剂量。
3个剂量中,有1个剂量应相当于人体推荐摄入量(折算为每公斤体重的剂量)的10倍
最高剂量不得高于人体推荐摄入量的30倍
剂量必须在毒理学评价的安全剂量范围内
五、实验时间
一般30天
六、结果判定
1.细胞免疫功能
小鼠脾淋巴细胞转化实验和DTH反应实验结果均为阳性,或其中一个实验的两个剂量组结果阳性,则可判定样品具有增强细胞免疫作用
2.体液免疫功能
抗体生成细胞实验和血清溶血素测定如结果均为阳性,或其中一个实验的2个剂量组结果阳性,可判定具有增强体液免疫作用。
3.单核/巨噬细胞功能实验
小鼠碳廓清实验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验结果均为阳性,或其中一个实验的两个剂量组结果阳性,可判定具有增强非特异性免疫作用
NK细胞活性
一个以上剂量组结果阳性,可判定具有增强NK细胞活性作用
在1-4项实验中,若有2个功能检测呈阳性(其中1,2,3应在以上单项功能判定的基础上),可判定该样品具有增强免疫作用。
对1-4任何一项实验,具有抑制作用,可判定该样品具有免疫抑制效应。
七、实验方法
1. 细胞免疫
小鼠脾淋巴细胞转化——MTT或放射性核素掺入法
DTH反应——耳肿胀法或足足石增厚法
2. 体液免疫
抗体生成细胞实验——Jerne改良玻片法)
血清溶血素实验——血凝法和半数溶血值HD50法测定
3. 非特异性免疫
小鼠碳廓清实验
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验——滴片法或半体内法
NK细胞活性
乳酸脱氢酶测定(LDH)法和放射性核素3H-TdR
八、法规要求将来可能增加的评价
血液学检查项目
细胞分化抗原分类检测
细胞分类计数指标
淋巴细胞转化增殖实验的改进
增加新方法:
5-溴脱氧尿苷掺入标记检测细胞增殖动力学指标
抗增殖细胞核抗原单抗或PCNA免疫组化染色
CFSE标记细胞检测细胞增殖能力
B淋巴细胞对有丝分裂原的反应性(LPS诱导)和混合淋巴细胞反应评价
单核/巨噬细胞吞噬功能实验
增加新方法:
单核/巨噬细胞计数
单核/巨噬细胞吞噬荧光微球的能力
单核/巨噬细胞吞噬FITC标记的细菌的功能
单核/巨噬细胞吞噬凋亡细胞的功能
单核/巨噬细胞呼吸爆发、趋化作用及细胞溶解活性,细胞因子释放活性氧和活性氮等的定量检测。
NK细胞活性测定
增加新方法:
微细胞毒性方法
4h51Cr释放测定法
您可能关注的文档
最近下载
- 高清晰全欧洲铁路网地图.pdf
- 组建创业团队.ppt VIP
- 常见的新生儿高频振荡通气(周伟).ppt
- 第九篇:同红军在一起(续)-初中语文八年级上册名著《红星照耀中国》导读系列课件.pptx VIP
- 融创首创武汉经开国际智慧生态城市149R2地块项目超高层避难层悬挑支模架专项施工方案.pdf
- 部编版道德与法治六年级上册8《我们受特殊保护》(教案).docx
- 统编版选择性必修1与岳麓版必修(Ⅰ)高中历史教科书比较研究——以“政治制度”单元为例.pdf
- 小学五年级上册道德与法治 独领风骚的古代技术创造 教学设计 .pdf
- 浙江省义乌市小商品出口贸易结构现状存在的问题及对策.docx
- 《专业认知实习(2)》实习教学大纲.docx VIP
文档评论(0)