柱层析法分离纯化辅酶Q_（10）研究.pdfVIP

2012年 6月 蚌埠学院擎稚 Jun．2012 第 1卷 第 3期 JournalofBengbuCollege Vo1．1，No．3 柱层析法分离纯化辅酶 Q。o研究 陶志杰，王改玲，李 妍，王苏芹，周 虹 (蚌埠学院 生物与食品工程系，安徽 蚌埠 233030) 摘 要：以花生芽为试验材料 ，采用丙酮研磨法提取辅酶Q．。，对提取物用薄层层析和柱层析色谱法进行纯化研究。 实验结果表明：在石油 乙醚 (6／1，v／v)中展开后碘蒸气显色，可得到5个清晰的黄色斑点。硅胶柱层析分离条 件：0．5mL样量上 10mill×600mm层析柱 (硅胶 60～100目)，流动相为石油 乙醚(6／1，∥口)，流速 2．0mL／min， 收集36～50min洗脱液。分离出的辅酶 Q10纯度平均为 92．96％。 关键词：辅酶Q。；硅胶吸附剂；薄层层析；柱层析 中图分类号：Q814．1 文献标识码 ：A 文章编号：(2012)03—0011一o4 StudyonSeparationandPurificationforCoQl0byColumnChromatography TAOZhi-jie，WANGGai—ling，LIYan，WANGSu-qin，ZHOUHong (DepartmentofBiotechnologyandFoodEngineering，BengbuCollege，Bengbu，233030，Anhui) Abstract：CoenzymeQ1owhichwasextractedbyacetonegrindingfrompeanutbudwereseparatedand purifiedbythin layerchromatographyandsilicagelcolumnchromatorgaphy．Theresultsshowedthat samplesolutionwasappliedtosilicagelGplates，whilemixtureofpetroleumether／aether(6／1，v／v) wasusedasmobilephase．Afterdetectedintheiodine—cylinder，thereappearedfiveyellow spots．Th e optimum conditionforsilicagelcolumnwereconfirmed：0．5mL ofextraction solution from peanutbud wasappliedtosilicagelcolumnlOmm ×600mm (60～100mesh)whilemixtureofpetroleumether／ aether(6／1，v／v)wasusedasmobilephase．Theflowratewas2．0mL／min，collectNo．36—50mins eluent．ThemostcontentofCoQ10was92．96％． Keywords：CoenzymeQ10；silicageladsorbent；thinlayerchromatorgaphy；columnchromatorgaphy 辅酶Qlo(CoenzymeQ1o，CoQ1o)，化学名称为2， 他方法相比，生物细胞培养法原料廉价，培养条件易 3一二甲氧基 一5一甲基 一6一癸异戊烯基 一苯醌，常 控制，产品纯度高等优点已成为当前主要的生产方 温下为黄色或淡黄色结晶状粉末，易溶于氯仿、苯、 法，但研究进展缓慢，如何从细胞中快速分离纯化 四氯化碳，溶于丙酮、石油醚和乙醚；微溶于乙醇，不 CoQ。。是技术难题关键之一。据资料报道，目前主要 溶于水和甲醇；遇光易分解成红色物质，对温度和湿 通过硅胶吸附纯化 CoQm硅胶吸附操作简便，成本 度稳定uJ。CoQ，。在细胞线粒体 内呼吸链质子转移