实验动物一般操作2 卫生毒理学.ppt

实验动物一般操作技术 Ⅱ ――兔、豚鼠 一. 实验目的： 熟悉实验动物的选择和染毒途径。 掌握兔、豚鼠实验的基本操作技术。 二. 实验内容： 试验动物选择及要求 兔和豚鼠的抓取和性别鉴定 兔和豚鼠常用的编号标记及分组方法 兔和豚鼠常用的染毒方法 生物样本的采集 兔和豚鼠的处死方法 1. 实验动物选择及要求： 按照标准，了解遗传背景以及生理特征，根据实验要 求选择，经检疫1~2周后，剔除不健康动物。 ①外观：体形丰满，被毛浓密有光泽并紧贴体表、眼睛 明亮，反应行动灵活；无明显疾病症状。 ②体重和年龄：急性毒性试验--成年；慢性试验--幼年(特殊 要求外) 豚鼠 兔 急性： 450~700g 2.0~2.5Kg 慢性（亚慢性) 150~200g 1.5~1.8Kg ③实验目的 皮肤刺激试验和致敏试验------豚鼠 皮肤刺激试验和眼刺激试验----兔 2. 兔和豚鼠的抓取和性别鉴定 3. 兔、豚鼠编号标记及分组 常用的标记方法有： 耳打孔；耳标记；苦味酸（黄色）；品红（红色）染色法 常用的分组方法： 完全随机分组；配伍组随机分组；“Z”字型分组 注意：组间、组内的同性别动物体重差异不能过大 4. 兔和豚鼠常用的染毒方法： 1）经口染毒：灌胃 注意：灌胃前应禁食；兔--扩口器 豚鼠：灌胃针 剂量：豚鼠 1.0~5.0ml/100g 兔 5.0ml/1Kg 2）经皮肤染毒： ①皮肤刺激和致敏实验： 皮肤刺激实验常用兔和豚鼠；皮肤致敏实验常用豚鼠。 ②实验动物被毛： 机械法（剪毛）或化学法（硫化钠/脱毛膏） 本次实验采用脱毛膏进行化学脱毛法；脱毛面积（小 于10%）约 5×5cm2或4×4cm2，染毒2.5×2.5cm2。 注意：皮肤要清洗干净，不能损伤！ 5. 样本的采集 ①血液采集（非终末采血）： 1）兔/豚鼠耳缘静脉、隐静脉、颈静脉；5号半针头；少量 2）兔心脏采血法；采血量约为18ml； 3）兔耳中央动脉取血；（用6号针头）一次可取血15 ml。 ②尿、粪采集： 1）兔、豚鼠：代谢笼，粪尿分离器（半衰期长的受试物）。 2）尿道插管（半衰期短的受试物） 6. 实验动物的处死： 麻醉致死法：豚鼠 采用化学物质如：氯仿、乙醚、CO2 麻醉后急性放血法：剪断股动脉，血液大量流出，动物迅速死亡。 空气栓塞法：兔、狗、猴等大动物 化学药物致死法： 兔、狗、猴等大动物 常用10%KCl或10%甲醛溶液进行静注射。 脊髓脱臼法： 豚鼠、大鼠和小鼠。 请人道地处死试验动物！ 三、实验记录 四、实验报告书写和实验讨论： 五、注意事项： 1. 抓取动物时小心不要被咬伤，如果被咬伤需立 即用清水冲洗并用碘酒消毒。 2. 抓取动物时用力要恰当,防止动物窒息死亡。 3. 抓取动物时要小心其身上可能存在的虱子。 4. 注射染毒时要注意安全，注射器不用时要盖上盖 子，不要被扎伤。 5. 减轻实验动物的痛苦，始终贯彻“3R原则”实验动 物在做完所有操作后才进行处死，处死后的动物 不要与其他垃圾混合丢弃。 本次实验要进行的操作 兔和豚鼠的抓取和固定、性别 兔---灌胃 兔---耳缘静脉注射染毒和采集血样 豚鼠---被毛（脱毛膏） 豚鼠---脱臼处死；兔---空气栓塞处死 * * *