亚低温对大鼠全脑缺血保护作用机制的研讨.pdfVIP

亚低温对大鼠全脑缺血保护作用机制的研究 中 文 摘 要 目的; 研究亚低温对全脑缺血 鼠海马区细胞凋亡及抗凋亡基因 Bcl-2、促凋亡基因 Bax蛋白表达的影响，以探讨亚低温在脑缺血再灌 注损伤中起保护作用的分子生物学机制。 方法 以雄性Wistar大鼠 (250-300g)为研究对象，采用双侧颈 总动脉夹闭加静脉放血的全脑缺血模型。根据模型判断标准，筛选大鼠 24只。随机分成三组 (n=8)，非缺血对照组 (Sham组):未予脑缺血处 理，体温保持正常 (36.50C一37.50C);常温缺血组 (NT组):全脑缺血， 体温正常;亚低温缺血组 (HT组)全脑缺血，体温降低至320C-330Co 全脑缺血时间20分钟，低温持续 3h。于再灌注 72h断头取脑，用原位 末端标记法 (TUNEL)测定海马区细胞凋亡，同时做免疫组化法以检测 Bcl-2,Bax蛋白表达情况。 结果:除了低温这个控制条件外，其他的生理参数各组间差异不显 著。TUNEL染色 :HT组 TUNEL 阳性细胞百分数明显少于 NT组 (Po.01)，但多于Sham组 (P)00..1 Bcl-2,bax蛋白表达:脑缺血 后，两者都有广泛的表达，NT组和HT组的bcl-2,bax阳性细胞百分 数明显高于 Sham组 (P0.01);低温不影响它们的表达，HT,NT两组 间的差异不明显 (P0.05). 结论 :亚低温减少全脑缺血后的细胞凋亡，说明亚低温对脑缺血 再灌注损伤脑保护作用的机制之一是减少神经细胞凋亡。亚低温不改 变促凋亡基因bcl-2和抗凋亡基因bax的蛋白表达，说明该实验条件下， 亚低温减少神经细胞凋亡不是通过改变这两种基因的表达而实现的。 [关键词〕亚低温 :脑缺血; 脱噬作用; 基因:Bcl-2,Bax Abstract Mechanisms of cerebroprotective effect produced by mild hypothermiafollowingglobalcerebralischemiainrats Objective:Investigatetheeffectsofmildhypothermiaoncell apoptosisandproteinexpressionofantiapoptoticgenebcl-2,proapoptotic genebaxfollowingglobalcerebralischemiainhippocampusofrats,in ordertostudythemolecularbiologicalmechamismsofcerebroprotective effectproducedbymildhypothermia. Methods:Theglobalcerebralischemiawasinducedbyocclusionof bilateralcommoncarotidarteriesandwithdrawalofveinblood.Having metmodelcriteria,twenty一fourmaleWistarratsweighing250一300g wereselectedandrandomlyassignedtooneofthefollowinggroups: shamoperationgroup(groupSham,n=8):nocerebralischemia,therectal temperaturewasmaintainedatnormothermiclevel(36.5℃~37.50C); normothermic ischemia group(group NT,n=8)二undergoing cerebral ischemia,normothermia;mild hypothermia ischemia group(group HT,n=8):undergoingcerebralischemiaundermildhypothermia(32℃一33 C).Intraischemicmildhypothermiawasappliedfor3h.Following20min forebrainischemia,theratbrainswereremovedat72hafterreperfusion. Thener