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人lamda3干扰素(hIFN．入3)基因克隆及表达
马丽丽1王建红盛伟华谢宇锋杨吉成。
苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室 215007
摘要：目的：构建表达hlFN．入3基因的真核表达载体，并在COS．7细胞中表达具有
抗病毒活性的rhIFN．入3蛋白。方法：用I=I腔滤泡炎病毒VSV刺激A549人肺腺癌细胞，
抑制试验研究表达产物的抗病毒活性。结果：经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序确
证重组人载体中的基因片段不仅方向正确，而且确为hIFN入．3，与GeneBank报告序列完
全一致，并成功地在COS．7细胞中瞬时表达了具有抗病毒活性的rhIFN．入3蛋白。结论：
本研究成功地克隆出如烈．入3基因编码序列并在COS．7细胞中获得瞬时表达，证明了
rh．IFN．入3蛋白具有抗病毒活性，为今后干扰素的基因治疗奠定了基础。
关键词：hIFN．入3RT-PCR基因克隆表达COS．7细胞
Genecloneand ofhumaninterferon-入3
express
lili
Ma weihuaXie
WangjianhongSheng yufengYangjicheng
construct vectorand in
Abstract：Objective：Toeukaryoticexpression tO COS-7
express
ceUshumaninterferon·入3that characteristicof
proteinpossessing
whichhave
RNAfrom carcinomacellA549 beenstimulatedvesicularstomatitis
lung by virus，
reactiontheminto
chain throughout themwith
reverse-transcribing·polymerase DNA，ligating
recombination and
plasmidpcDNA3．1／myc—his(-)A，formingpcDNA3．1A-hIFN-入3
expressing
inCOS·7ceUs．Theeffectofantivirusof is witha
expressedproductinvestigatedcytopathic
effectreduction hasbeen
hlFN一入3 identifiedwiththeuseof
assay．Result：Thesequence
endonucleasesandDNA
PCRsestricfion hlFN一入3 is
analysis sequencing．The
sequence
definednot correc
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