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人乳铁蛋白eDNA的克隆及在家蚕细胞中的表达
裁涛鞭遴瓣
(浙江大学煞物化学讲究所，杭州，310029；浙江理正大学生物化学研究所．杭州，310018)
孛舅捧4个hLFcDNA穿溪袅商蠢度嚣弱深性《蒜漂性透裂辨荡X将大墨蝻毛蛋鑫eDNA毙
隆在璇粒油acPAK8鹃Bam
质粒DNA与已线性化BacPAK6病毒栋基因缀DNA经脂质体介导拭转染家羲培养细胞BmN，
寝壤养熬然壁缨憝孛_撬凄空斑，经避3轮纯纯，获褥重缒麟BacPAK-hLFo蛋塞囊免疫露渣
法捡测到在重组病毒感染的家蚕细胞中存在入乳铁噩自基因鼢表达产物，分子量约为+78kD，
ELISA法测定结果表明重组病毒感染的家蚕细胞中rhLF相对表达壁在表达144小时达到最高
燕，约秀13。5攥g龟。重缀hLF斡添辨堡耪活性试验表爨其黠大瑟耩蓥其寒辩藏滔性。
关键词 人乳铁蛋白cDNA，家蚕细胞，重组杆状病毒
eDNA and ofHumanLactoferrininBmNcells
Expression
Cloning
LIUTaol Yao-Zhou2‘
ZHANG
(SlnatituteofBiochemistry,CollegeofLifeSc／encea,Zhefiang
2
Institute
ofBiochemistry,ZhejkmgUniversity
AbstractHumanlacmfcrrineDNAwas RT-PCRfromnormalhuman
amplifiedby
withotherfourhLFeDNA in
C,-enBankshows
mammarytissue。Comparision sequencesre豳tercd
inDNA wasinsertedintothe
99％homologysequence．，】渤ehl蔗gene baculovirustransfervector
therecombinant wasCO．transfectedwithlinearized
pBacPAK8。and plasmidpBacPAK．hLF
Bm-BacPAK6virus蛰弧焱into嚣魁K
cells，then recombinationoccurredinsidethecells，
homologous
TherecombinantvirusBacPAK-hLFwas threetimes andidentified
punfied by plaques
screening
Southern human was in
lactoferrin BraNcellsinfected
by blotting+T醣recombinantexpressed
withrecombinant wererunOilthe7．5锈SDSandtheir
virus。髓转expression
products
immunoreacfififiesweredeterminedWestern
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