人GPx1基因的克隆及其序列分析(1)研究.pdfVIP

中.翻钧生.拉术，术研讨会 (2000.石奋庄)论文. .兜论文 .发醉过程中应对pH加以控制，考虑到菌体的生长及保持最大的葡萄糖酸激酚活力，pH 最好控制在72左右 .D-核糖发酵属中等程度的好氧发醉，溶氧过高或过低，均对 D-核糖发酵不利。发酵 过程中溶氧最好控制在40%左右，搅拌转速450rpm,通风Ivvm .在发酵过程中对pH,溶氧进行了控制，井用葡萄糖酸调竹州 和补料，可使D-核糖 的谬产量由45妙 提高至65叭，产最提高30%左右 .考文公 I DeWulfP,VandammeEJ.ProductionofD-ribosebyfermentation.App!iVicroBintechnol, 1997,48:141一148 Z DeWulfP,VandantmeEJ.SpecificorganicacidsenhancetheD-riboseproductivityofa rtansketolasrdefectiveBaciflwsubtilisstrain.JChemTechnolBiotechnol,1997.70:311-315 3 高淑红，邱蔚然，丁庆豹等D-核糖产生菌的选育及其发酵的研究.IIP)HI丈笋I-I撷, 2000.26(1):37-40 4 Miller(3.L,GolderR.H.MillerE.E.DeterminationofPentoses.AnalyChem,1951.23(6): 903~ 905 人GPxi‘因的克.及其序列分析 贺华君 衷勤生 (华东理工欠学生物工程学院，上海 200237) 摘 要 用逆转录一聚合醉链反F (RT-PCR)，以中国人胎盘组织总RNA为模板， 阔增了人谷脱甘肤过载北物酶 (GPxI)的cDNA，并进行序列分析 序列分析表明， 从中国人胎盘组织中克隆的GPx.基因，与国外文献报道相比，只有 1个氮基酸残基 发生变异，即Leu22变为Va122 经计算机软件二级结构分析表明，这一个氛基酸的 变化不影响GPxI活性中心的结构 并将已发现的人GPx家族的五种GPx氛基酸琦 列进行了比较. 关.甸 GPx,东因克隆、序列分析 GPx家族，SOD 谷眺甘肤过氧化物酶 (EC.Lll.1.9.Glutathiorteperoxidese,GPx)是哺乳动物所发现的 含硒酶，该酶催化以下反应; 2GSH+H,O,一一 GSSG+H,O 2GSH十ROOH一~ GSSG+ROH+H,O 通过还原性谷眺甘肤催化还原过氧化氢和有机过氧化氢物，从而保护细胞和其它如 DNA,蛋臼及脂质体等敏感生物分子免受氧自由基的损伤m。到目前为止人GPx家族己有五 个成员，它们分别是:胞质内GPx(ClassicorCytosolicGPx.GPxl)、胃肠一道特异性GPx 139 中.蔺.生.技术攀术研材会(，，石.庄)碑鑫鱼 — 一 一一— 一卫些丝. (P卜ospholipid卜rydoproe川eG入 Gp对)以及附肇特异性6六 (印ldid”lus一spCeificG六 PG酒) G入1和GPx3为相同亚基组成的四聚体，能清楚过氧化氮和脂肪酸过氧化氢;而磷 脂GPx4以单体形式存在 主要清楚磷脂和胆固醇过氧化氧;而6Pxs可能与保护精液免受脂 质体过氧化的毒害有关!了一气 GPx 家族的前四种酶都是含硒酶.每 个亚基含一个硒代半耽氨酸，’心是由读码框内的 乳白UGA编码的.而且该为点也是CPx酶的活性中心。而GP劝不含硒代半脱氨酸，其相 应位点妇1愉u编码 Gpx匀和GPxs能分泌到细胞外，为胞外酶;而其余三种则为胭内酶饰” 我们知道目前己知人体内osD有三种同工酶:胞桨c。，nz一SOD、线粒体Mll一s0D和胞 外优一500。5OD能将超氧阴离子白山基歧化为H众和。，如果从认得不到及时清除，它 能通过Fejll0II反应产生毒性的轻基自由基 H认的清除依赖于协同的抗氧酶体系GPx和过氧 化