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发酵过程优化与控制技术研究
Swiss BiotechnNet 发酵过程优化与控制技术研究 举例4: Transglutaminase: Activation Mechanism and Fermentation Optimization 通过 Nε-(γ-谷酰胺) 赖氨酸键交联蛋白质 催化蛋白质中Gln的γ-羧酰胺基与伯胺间发生转移反应 蛋白质脱酰胺作用 通过形成脂键共价连接蛋白质和脂肪酸的长链ω-羟基 目前唯一商业化并大规模生产的可在蛋白质间形成共价交联的酶制剂 举例4: Transglutaminase: Activation Mechanism and Fermentation Optimization 小 结 对微生物发酵过程进行解析(生理、动力学、代谢网络) 根据不同发酵过程的特点,提出相应的优化控制策略 实现微生物发酵过程高产量、高产率和高生产强度的有机统一 Activation Mechanism of Transglutaminase Pre-Pro-TGase Secreted from cells folding Pro-TGase Inhibitor (TAPI) Inhibition Protease-inhibitor complexs activation Serine Protease MetalloProtease TGase Pro-region (AAs) + 根据该TGase活化模型:在发酵过程的产酶初期: *添加1000 U/mL的胰蛋白酶,使发酵过程酶活提高31.2 % *添加10 mg/mL的CTAB,使发酵过程酶活提高21.8 % 举例4: Transglutaminase: Activation Mechanism and Fermentation Optimization Determine of culture medium by analysis of amino acid metabolism using mass balances Amino acid metabolic anylysis of Streptomyces Mobaraense Two-stage pH and agitation speed control strategy for TGase fermentation. DO1 DO2 DO2 DO1 pH1 pH2 举例4: Transglutaminase: Activation Mechanism and Fermentation Optimization pH1:7.0; pH2:6.5 DO1:转速300 rpm; DO2:转速200 rpm 堵国成江南大学gcdu@jiangnan.edu.cn 生物质原料 化学品 -精细化学品 -大宗化学品 -食品添加剂 -生物塑料 -溶剂 -酚类 -粘合剂 -脂肪酸 -碳黑、颜料 -燃料、香料、墨水 -洗涤剂 生物能源 -生物酒精 -生物柴油 -甲醇 -氢气 -沼气 工业生物技术主要部分--发酵工程 获得应用价值的微生物 反应器及过程放大 发酵过程优化和控制 发酵工程研究 发酵产物分离提取 发酵工程的关键问题和工程意义 微生物能够积累最大目的产物 (产量)的条件是什么? 高产量 ? 便于产品分离提取 关键问题1 工程意义1 相关研究:微生物生理、遗传特性和营养、环境因素 底物最多被微生物转化为产物 (转化率)的条件是什么? 粮食原料为底物 ? 高转化率 ? 降低原料成本 关键问题2 工程意义2 相关研究:微生物代谢途径和过程条件 发酵工程的关键问题和工程意义 微生物最快速度发酵生产目的产物的条件是什么? 分批操作为主 ? 高生产强度 ? 缩短生产周期 工程意义3 关键问题3 相关:微生物反应动力学和系统优化 发酵工程的关键问题和工程意义 条件确定 过程优化 初始条件 过程分析 过程强化 发酵优化的研究思想:发酵是一个过程 基于细胞表观特性进行优化 0 4 8 12 16 t / h d (DCW) / (g/L) A 0 20 40 60 80 100 120 140 t / h r (Glucose) / (g/L) B 0 20 40 60 80 0 10 20 30 40 50 60 70 80 t / h r (Pyruvate) / (g/L) C 基于细胞内部分析进行优化 高产量 高底物转化率 高生产强度 优化策略 在理论和技术上有突破,在工业生产中能广泛应用 显著提高发酵过程的经济性和科学性 研究方法
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