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实验十一 荧光分光光度法测定亚甲蓝注射液的含量
实验十一 荧光分光光度法测定亚甲蓝注射液的含量 教学目的与要求： 1.掌握荧光分光光度法的原理、测定方法及注意事项。 2.掌握亚甲蓝注射液的荧光分光光度测定方法。 亚甲蓝分子结构中含有吩噻嗪环，不但有长共轭结构，而且分子的刚性和共面性程度大，因此可产生较强的荧光．同时亚甲蓝分子中的供电子取代基二甲氨基可使分子电子共轭程度增加，荧光强度加强。 本品含亚甲蓝应为标示量的90.0％～110.0％ 三、操作步骤 1．标准曲线的制备 精密称取亚甲蓝固体 50.0 mg，置于 100 mL容量瓶中，蒸馏水溶解并定容至刻度，摇匀，制得0.50 g/L亚甲蓝贮备液。使用时，再以l mmol/L HCL稀释为 5.0μg/mL的亚甲蓝标准液。准确移取亚甲蓝标准品溶液 1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL，分别置 50 mL容量瓶中，加 l mmol/L HCL至刻度。在600nm/687nm(激发/发射)波长处测定相对荧光强度，绘制标准曲线。 2．样品测定 取亚甲蓝注射液适量，加 l mmol/L HCL定量稀释为每 l mL约含 0.5μg亚甲蓝的溶液，测定相对荧光强度，计算标示量百分含量。 四、注意事项 1．所用玻璃仪器均应用洗液洗涤，不得使用洗涤剂（肥皂、洗衣粉等），以防带入荧光物质的干扰。 2．所用水、甲醇等溶剂均应为同一批号溶剂，否则将引起误差，导致结果不准确。 五、计算 标准曲线法 R=aC+b 相关系数R=？ * * *
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