应用单分子荧光成像技术研究中药抗运动性疲劳分子学机理研究.pdfVIP

DissertationforMaster ofSouthChina Degree Normal University ontheMolecular Study Mechanismsof Exercise--induced Eliminated Fatigue by ChineseMedicinewithSingle--molecule Fluorescence ImagingTechnique 一，一 一 YiLIU DirectiveProfessor： ZHAO Yanping B of Collegeiophotonics SouthChina Normal University May30th，2010 摘要 应用单分子荧光成像技术研究中药抗运动性疲劳 分子学机理 专业名称： 光学工程 学位申请人： 刘艺 导师姓名： 赵燕平 副教授 摘要 中药人参和红景天因其明显的抗运动性疲劳效果，被广泛应用于抗疲劳中药 复方和保健食品的研制，然而有关抗运动性疲劳的分子机理尚未阐明。在以往文 献的研究工作基础上，本文首次将单分子荧光成像技术应用于中药人参和红景天 提取物抗运动性疲劳的分子药理研究。通过检测大鼠骨骼肌细胞胞浆钙离子的荧 光强度，讨论大鼠骨骼肌细胞胞浆钙离子浓度与运动性疲劳的关系。在此基础上， 参照建立肌肉损伤细胞模型的方法，建立了运动性疲劳的细胞模型，通过观察人 参和红景天有效成分对运动性疲劳细胞模型的作用，进一步阐明中药人参和红景 天提取物抗运动性疲劳的分子机理。 论文首先介绍了运动性疲劳的定义、传统医学和现代医学对其机理的认识、 中(西)医学抗运动性疲劳的研究进展，重点讨论与钙离子相关的运动性疲劳机 制的研究现状。大量文献报道：运动引起Ca2+转运能力的下降。胞浆中Ca2+的积 累被认为是引起骨骼肌疲劳的重要因素。 在另一方面，对光学检测技术在运动性疲劳和植物药药效研究方面的应用情 况进行相关文献整理的结果显示，迄今较少有支持运动性疲劳后胞浆钙离子浓度 积聚的直接证据。在对激光共聚焦显微镜的原理、方法及其在钙离子成像中的应 用等问题进行了相关综述的文献工作基础上，研究采用激光共聚焦显微镜测定运 摘要 动性疲劳前后骨骼肌细胞胞浆游离Ca2+浓度的变化。讨论游泳力竭运动对大鼠骨 骼肌细胞钙离子稳态的影响。所获研究结果证实，胞浆游离钙离子浓度的升高是 导致运动性疲劳的重要原因之一，实验结果为运动性疲劳的分子机制研究提供了 相应分子影象学证据。 在此基础上，参考有关文献，采用新生大鼠骨骼肌细胞，制作地塞米松刺激 大鼠骨骼肌细胞运动性疲劳模型，探讨中药人参提取物消除运动性疲劳的机制。 对人参提取物组和空白对照组随机分组细胞的培养基中分别加入2mg／m1人参提 取物和等量的D